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2021-07-29
染色质免疫共沉淀可以：（1）组蛋白修饰酶的抗体作为「生物标记」；（2）转录调控分析；（3）药物开发研究；（4）DNA 损失与凋亡分析。实验步骤：一、细胞的甲醛交联与超声破碎（ 第一天）1. 取出 1 平皿细胞（10 cm 平皿），加入 243 ul 37% 甲醛，使得甲醛的终浓度为 1%（培养基共有 9 ml）。2. 37℃ 孵育 10 min.3. 终止交联：加甘氨酸至终浓度为 0.125 M。450 ul 2.5 M 甘氨酸于平皿 查看更多
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2021-07-17
KJMR-II型血液混匀器 查看更多
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2021-09-14
SK-1型快速混匀器快速混匀器又称旋涡混合器，主要依靠装液容器与旋盘的平稳接触，使容器内的溶液快速混匀，混匀速度由人为施加的压力大小调节。是生物、遗传、医学、环保、水产、生化实验室、分析室、教育科研的必备工具。SK-1型快速混匀器SK-1 Swift Mixer型 号TypeNo.工作方式Working Style振荡幅度 (mm)Vibration Range (mm)振荡频率 (rpm)Vibration Frequence (rp... 查看更多
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2021-08-29
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2021-07-15
Eppendorf 产品广泛应用于学术科研和商业研究机构，如制药、生物技术以及化学分析和食品行业，以及临床和环境分析实验室、法医检测和进行需要过程分析、生产及质控的工业生产实验室。 查看更多
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2018-03-23
恒温混匀仪MSC-100是由上海净信实业发展有限公司代理或销售的上海净信品牌的仪器，产品来源于上海。上海净信实业发展有限公司是中国最权威的恒温混匀仪MSC-100销售服务商之一，在上海等地方销售恒温混匀仪MSC-100已经多年。同时，生物在线为您提供众多企业恒温混匀仪MSC-100仪器产品及图片，以便挑选到性价比高，合适的恒温混匀仪MSC-100产品 查看更多
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2017-05-22
在医学和生物学领域，在实验的过程中，经常需要在恒温下对实验对象进行振荡混匀操作。如果用人工的方法，既不好保证恒温，更不容易振荡混匀，为了解决这个难题，技术人员研发出恒温混匀仪，它可以在很短的时间内就达到实验要求的温度并且保持恒温，而且可以轻易的实现振荡混匀的操作，这在很大程度上加快了实验的速度，不但提高了工作效率，更重要的是实验的准确度大大的得到了提升。 查看更多
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2018-07-16
bio-rad脉冲场电泳槽 选实验仪器设备，还在上海通善。 您的选择，就是对我们公司的肯定。 相信通善，相信自己，我们有太多优势，让您在众多信息流中独具慧眼的找到我们。 一，通善的服务与态度 公司的宗旨是以更高的品质、更低的价格、更快的供货、更优质的服务的“四更”要求为国内广大科研实验工作者提供更为完善的产品供应渠道和售后服务。 二，通善的技术支持 上海通善公司是依托复旦大学，集研发、销售、实验室技术服务于一体的高科 查看更多
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2021-07-21
恒温混匀仪将恒温和振荡两种功能完美结合上海皓庄仪器有限公司开拓皓庄(LNB)品牌恒温 查看更多
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2017-07-26
北京佳源兴业科技有限公司在发布的MS-100恒温混匀仪供应信息，浏览与MS-100恒温混匀仪相关的产品或在搜索更多与MS-100恒温混匀仪相关的内容。 查看更多
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TYMR-Ⅰ血液混匀器 查看更多
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蚂蚁淘的创始人兼CEO是钟定松先生，具有十年的从业经验，在业界享有良好的口碑；
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请教天然橡胶的使用工艺及注意事项乳胶技术橡胶技术网123
swlrsis82017-09-30
一种碎胶机破碎系统，包括底座、转刀、固定刀、筛孔刀，所述底座前后面设有平板，平板上设置有旋转轴，转刀固定在旋转轴上，所述底座的内端面左右两侧设有固定刀，固定刀的刃部面向旋转轴，所述筛孔刀安装在底座下部，筛孔刀位于旋转轴的正下方。通过设置转刀、固定刀和筛孔刀，三刀同时工作，胶块受到三重切割，可有效快捷的将大胶块破碎并且得到预定规格胶粒的颗粒更加均匀，降低了功耗，提高了工作效率，同时设置有液压缸控制筛孔刀的抽出和复位，打开门时便于对检修刀具及对内部进行清洁，不仅结构简单、操作维护也更加方便，且经济实用。
处方分析全123
选择性失忆19922017-09-30
硼酸和石蜡研磨能充分混匀吗
超声波细胞破碎123
ecor2004-10-19
样品的制备有什么要求?烘干,破碎过筛,混匀,缩分各工序的要点是什么123
温柔攻DN2017-09-30
样品一般都要做到最好，你看成品的具体要求，水分、细度、合格率等。
【求助】超声处理细胞/细菌样品破碎DNA是否合理? 蛋白质和糖学...123
supermaltose2009-07-26
加loADIngbuffer裂解细胞/细菌以后，样品里面的DNA会和SDS形成一团东西，无法直接上样
平常都是用超声破清洗器水浴超声破碎大约20分钟，然后上样的
但是一方面，常温超声不知道会不会造成蛋白降解破坏，因为发现加冰以后超声会变得非常弱，所以都么加冰。另一方面，因为水浴超声声强是不均匀的，如果样品多的话，会发现有些已经超碎DNA，但有些还是一团。
不知道是否有其他更好的方法？
平常都是用超声破清洗器水浴超声破碎大约20分钟，然后上样的
但是一方面，常温超声不知道会不会造成蛋白降解破坏，因为发现加冰以后超声会变得非常弱，所以都么加冰。另一方面，因为水浴超声声强是不均匀的，如果样品多的话，会发现有些已经超碎DNA，但有些还是一团。
不知道是否有其他更好的方法？
如何除去破碎后的细胞中的生物大分子123
油条c222017-09-30
对细胞破碎后获得的生物大分子的电泳方法大都采用凝胶电泳。如果要分析核酸等大的DNA或者RNA分子通常利用琼脂糖凝胶电泳或聚丙烯酰胺凝胶电泳；如果是分析蛋白质，则通常在加入十二烷基硫酸钠的聚丙烯酰胺凝胶中进行。以DNA凝胶电泳为例，电泳的操作步骤如下：
1、安装电泳槽
将有机玻璃的电泳凝胶床洗净，晾干，用胶带将两端的开口封好，放在水平的工作台上，插上样品梳。
2、琼脂糖凝胶的制备
称取琼脂糖溶解在电泳缓冲液中，（按0.3-1.5%的琼脂糖含量，1-25kb大小的DNA用1%的凝胶，20-100kb的DNA用0.5%的凝胶，200-2000bp的DNA用1.5%的凝胶）置微波炉或沸水浴中加热至完全溶化（不要加热至沸腾），取出摇匀。
3、灌胶
将冷却到60℃的琼脂糖溶液轻轻倒入电泳槽水平板上。
4、待琼脂糖胶凝固后，在电泳槽内加入电泳缓冲液，然后拔出梳子。
5、加样
将DNA样品（DNA样品是细胞破碎之后用离心管离心沉淀获得的）与加样缓冲液按4：1混匀后，用微量移液器将混合液加到样品槽中，每槽加10-20μl，记录样品的点样次序和加样量。
6、电泳
安装好电极导线，点样孔一端接负极，另一端接正极，打开电源，调电压至3-5V/cm，电泳1-3hr，当溴酚蓝移到距凝胶前沿1-2cm时，停止电泳。
7、染色和观察
取出凝胶，放在含有溴化乙锭的染色液中染色30min，即可在254nm的紫外灯下观察，有橙红色荧光条带的位置，即为DNA条带，或在紫外灯下照相记录电泳图谱。溴化乙锭是致癌剂，操作时要小心，必须戴手套。
1、安装电泳槽
将有机玻璃的电泳凝胶床洗净，晾干，用胶带将两端的开口封好，放在水平的工作台上，插上样品梳。
2、琼脂糖凝胶的制备
称取琼脂糖溶解在电泳缓冲液中，（按0.3-1.5%的琼脂糖含量，1-25kb大小的DNA用1%的凝胶，20-100kb的DNA用0.5%的凝胶，200-2000bp的DNA用1.5%的凝胶）置微波炉或沸水浴中加热至完全溶化（不要加热至沸腾），取出摇匀。
3、灌胶
将冷却到60℃的琼脂糖溶液轻轻倒入电泳槽水平板上。
4、待琼脂糖胶凝固后，在电泳槽内加入电泳缓冲液，然后拔出梳子。
5、加样
将DNA样品（DNA样品是细胞破碎之后用离心管离心沉淀获得的）与加样缓冲液按4：1混匀后，用微量移液器将混合液加到样品槽中，每槽加10-20μl，记录样品的点样次序和加样量。
6、电泳
安装好电极导线，点样孔一端接负极，另一端接正极，打开电源，调电压至3-5V/cm，电泳1-3hr，当溴酚蓝移到距凝胶前沿1-2cm时，停止电泳。
7、染色和观察
取出凝胶，放在含有溴化乙锭的染色液中染色30min，即可在254nm的紫外灯下观察，有橙红色荧光条带的位置，即为DNA条带，或在紫外灯下照相记录电泳图谱。溴化乙锭是致癌剂，操作时要小心，必须戴手套。
【求助】5ml注射液生产上的装量问题 制剂技术123
syvictor2008-10-15
【求助】蛋白表达及菌体破碎问题 经验共享 分析测试百科123
huolizwh2009-02-15
我做大肠杆菌原核表达，选用pGEX系列载体，收集菌体超生破碎后离心取菌体上清，上清内有大量核酸，用GST亲和层析柱纯化蛋白，谷胱甘肽洗脱峰特别小。
问：1如才能提高柱子吸附蛋白量？
2样品中的核酸对吸附有无太大影响？
3我拟采用阴离子交换树脂，问pH8.0条件下除去核酸可否？
4怎么提高样品的澄清度？
问：1如才能提高柱子吸附蛋白量？
2样品中的核酸对吸附有无太大影响？
3我拟采用阴离子交换树脂，问pH8.0条件下除去核酸可否？
4怎么提高样品的澄清度？
【求助】酵母表达——玻璃珠振荡破碎细胞问题 经验共享 分析...123
beerni2008-06-10
在酵母表达表达时遇到问题：
1.少量表达时用玻璃珠振荡的方法破碎细胞，跑胶时蛋白量总是很低，有什么好的方法进行少量酵母细胞的破碎吗？
2.好像有一种试剂加到玻璃珠振荡破碎的酵母细胞样品中来镜鉴细胞是否破碎的，是什么试剂啊？
多谢指点！
1.少量表达时用玻璃珠振荡的方法破碎细胞，跑胶时蛋白量总是很低，有什么好的方法进行少量酵母细胞的破碎吗？
2.好像有一种试剂加到玻璃珠振荡破碎的酵母细胞样品中来镜鉴细胞是否破碎的，是什么试剂啊？
多谢指点！
【求助】关于用超声波破碎细胞的问题 经验共享 分析测试百科 123
血刺潇潇w椦2017-09-30
对细胞破碎后获得的生物大分子的电泳方法大都采用凝胶电泳。如果要分析核酸等大的DNA或者RNA分子通常利用琼脂糖凝胶电泳或聚丙烯酰胺凝胶电泳；如果是分析蛋白质，则通常在加入十二烷基硫酸钠的聚丙烯酰胺凝胶中进行。
以DNA凝胶电泳为例，电泳的操作步骤如下：
1、安装电泳槽
将有机玻璃的电泳凝胶床洗净，晾干，用胶带将两端的开口封好，放在水平的工作台上，插上样品梳。
2、琼脂糖凝胶的制备
称取琼脂糖溶解在电泳缓冲液中，（按0.3-1.5%的琼脂糖含量，1-25kb大小的DNA用1%的凝胶，20-100kb的DNA用0.5%的凝胶，200-2000bp的DNA用1.5%的凝胶）置微波炉或沸水浴中加热至完全溶化（不要加热至沸腾），取出摇匀。
3、灌胶
将冷却到60℃的琼脂糖溶液轻轻倒入电泳槽水平板上。
4、待琼脂糖胶凝固后，在电泳槽内加入电泳缓冲液，然后拔出梳子。
5、加样
将DNA样品（DNA样品是细胞破碎之后用离心管离心沉淀获得的）与加样缓冲液按4：1混匀后，用微量移液器将混合液加到样品槽中，每槽加10-20μl，记录样品的点样次序和加样量。
6、电泳
安装好电极导线，点样孔一端接负极，另一端接正极，打开电源，调电压至3-5V/cm，电泳1-3hr，当溴酚蓝移到距凝胶前沿1-2cm时，停止电泳。
7、染色和观察
取出凝胶，放在含有溴化乙锭的染色液中染色30min，即可在254nm的紫外灯下观察，有橙红色荧光条带的位置，即为DNA条带，或在紫外灯下照相记录电泳图谱。溴化乙锭是致癌剂，操作时要小心，必须戴手套。
扩展知识：
在外加直流电源的作用下，胶体微粒在分散介质里向阴极或阳极作定向移动，这种现象叫做电泳。利用电泳现象使物质分离，这种技术也叫做电泳。
凝胶电泳通常用于分析用途，但也可以作为制备技术，在采用某些方法（如质谱(MS)、聚合酶链式反应(PCR)、克隆技术、DNA测序或者免疫印迹）检测之前部分提纯分子。
琼脂糖 ( Agarose ) 是一种线性多糖聚合物 , 系从红色海藻产物琼脂中提取而来的。当琼脂糖溶液加热到沸点后冷却凝固便会形成良好的 电泳介 质 , 其密 度是由 琼脂 糖的浓 度决 定的。经过化学修饰的低熔点 (LMP) 的琼脂糖 , 在结构上比较脆弱 , 因此在较低的温度下便会熔化 , 可用于DNA片段的制备电泳。
聚丙烯酰胺凝胶主要有两种方式 : 一是用于分离和纯化双链DNA片段的非变性聚丙烯酰胺凝胶。在未变凝胶中分离 DNA的缺点是DNA的迁移 率受碱 基组成和序列的影响。由于无法得知未知DNA的迁移是否反常 , 故不能用未变性的聚丙烯酰胺凝胶电泳确定双链DNA的大小。二是用于分离及纯化单链DNA片 段的变性聚丙烯 酰胺凝 胶。这类聚丙烯酰胺凝胶是在核苷酸碱基配对抑制剂 ( 尿素或甲酰胺 ) 的存在下聚合而成 , 变性DNA的移动速度同其碱基组成及序列几乎完全无关 , 故可用于分离及纯化单链DNA片段和DNA测序等。
以DNA凝胶电泳为例，电泳的操作步骤如下：
1、安装电泳槽
将有机玻璃的电泳凝胶床洗净，晾干，用胶带将两端的开口封好，放在水平的工作台上，插上样品梳。
2、琼脂糖凝胶的制备
称取琼脂糖溶解在电泳缓冲液中，（按0.3-1.5%的琼脂糖含量，1-25kb大小的DNA用1%的凝胶，20-100kb的DNA用0.5%的凝胶，200-2000bp的DNA用1.5%的凝胶）置微波炉或沸水浴中加热至完全溶化（不要加热至沸腾），取出摇匀。
3、灌胶
将冷却到60℃的琼脂糖溶液轻轻倒入电泳槽水平板上。
4、待琼脂糖胶凝固后，在电泳槽内加入电泳缓冲液，然后拔出梳子。
5、加样
将DNA样品（DNA样品是细胞破碎之后用离心管离心沉淀获得的）与加样缓冲液按4：1混匀后，用微量移液器将混合液加到样品槽中，每槽加10-20μl，记录样品的点样次序和加样量。
6、电泳
安装好电极导线，点样孔一端接负极，另一端接正极，打开电源，调电压至3-5V/cm，电泳1-3hr，当溴酚蓝移到距凝胶前沿1-2cm时，停止电泳。
7、染色和观察
取出凝胶，放在含有溴化乙锭的染色液中染色30min，即可在254nm的紫外灯下观察，有橙红色荧光条带的位置，即为DNA条带，或在紫外灯下照相记录电泳图谱。溴化乙锭是致癌剂，操作时要小心，必须戴手套。
扩展知识：
在外加直流电源的作用下，胶体微粒在分散介质里向阴极或阳极作定向移动，这种现象叫做电泳。利用电泳现象使物质分离，这种技术也叫做电泳。
凝胶电泳通常用于分析用途，但也可以作为制备技术，在采用某些方法（如质谱(MS)、聚合酶链式反应(PCR)、克隆技术、DNA测序或者免疫印迹）检测之前部分提纯分子。
琼脂糖 ( Agarose ) 是一种线性多糖聚合物 , 系从红色海藻产物琼脂中提取而来的。当琼脂糖溶液加热到沸点后冷却凝固便会形成良好的 电泳介 质 , 其密 度是由 琼脂 糖的浓 度决 定的。经过化学修饰的低熔点 (LMP) 的琼脂糖 , 在结构上比较脆弱 , 因此在较低的温度下便会熔化 , 可用于DNA片段的制备电泳。
聚丙烯酰胺凝胶主要有两种方式 : 一是用于分离和纯化双链DNA片段的非变性聚丙烯酰胺凝胶。在未变凝胶中分离 DNA的缺点是DNA的迁移 率受碱 基组成和序列的影响。由于无法得知未知DNA的迁移是否反常 , 故不能用未变性的聚丙烯酰胺凝胶电泳确定双链DNA的大小。二是用于分离及纯化单链DNA片 段的变性聚丙烯 酰胺凝 胶。这类聚丙烯酰胺凝胶是在核苷酸碱基配对抑制剂 ( 尿素或甲酰胺 ) 的存在下聚合而成 , 变性DNA的移动速度同其碱基组成及序列几乎完全无关 , 故可用于分离及纯化单链DNA片段和DNA测序等。
[求助] 溶菌酶破碎大肠杆菌 生物科学 学术科研互动社区123
badigo2008-12-04
我打算做蛋白提取，以前单纯用超声效果不好，为了尽量保留活性，选择用溶菌酶见超声破碎的方法。
我按照分子克隆上的步骤：
1.菌体称重为0.4g，加PBSbuffer3ml（PH=8.05），充分混匀。
2.加现配的50mg/ml溶菌酶溶液240微升，至终浓度4mg/ml。冰置3小时。
3.超声400w，10s，10s，40次，结果目测还是乳白色，镜检很多菌体。
为什么破不开，搞不懂，我前几天做预实验的时候，还能变澄清？？？
注：预实验的步骤与现在的一样，只是菌体重量是0.1g加PBS3ml，再加溶菌酶至1mg/ml，超声400w，10s,10s,20次。
麻烦大家能给以帮助，先谢谢了...
我按照分子克隆上的步骤：
1.菌体称重为0.4g，加PBSbuffer3ml（PH=8.05），充分混匀。
2.加现配的50mg/ml溶菌酶溶液240微升，至终浓度4mg/ml。冰置3小时。
3.超声400w，10s，10s，40次，结果目测还是乳白色，镜检很多菌体。
为什么破不开，搞不懂，我前几天做预实验的时候，还能变澄清？？？
注：预实验的步骤与现在的一样，只是菌体重量是0.1g加PBS3ml，再加溶菌酶至1mg/ml，超声400w，10s,10s,20次。
麻烦大家能给以帮助，先谢谢了...
冻融法破碎细胞的冻融时间与破碎程度有无关联 细胞技术讨论版...123
sun212021-07-20
想问一下，一般破碎细胞冻融时间要多久，几次。冻融时间与次数与细胞破碎程度有关吗？因为我们这一般都是十二小时一次，共三次。但因为我必须一天完成，所以我第一次三小时，化一小时，第二次二小时，化半小时，第三次冻只有一小时。我不知这样破碎是否完全。
另外还想问一下，还有其他可行的破碎方法吗
谢谢
另外还想问一下，还有其他可行的破碎方法吗
谢谢
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