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SiRNA干扰后多长时间检测调控蛋白的变化
2021-07-22
问题描述:

有问题要请教实验前辈!

用SiRNA抑制蛋白A的表达,SiRNA转染48小时后可观察到蛋白A表达明显下降.

现在想检测SiRNA抑制A蛋白表达后对凋亡蛋白、迁移蛋白及周期蛋白的影响,应该在SiRNA干扰后多长时间检测这些蛋白的变化?48小时?72小时?96小时?

望高手解答,我的理解是转染48小时后A蛋白表达下降,如果要观察A蛋白对以上蛋白的影响,应该在转染后超过48小时再检测这些蛋白的变化,比如72小时或96小时,不知道我的理解对不对?

先谢了!

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skywalkerzz
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有高手报告解答一下吗?谢谢!
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徐博1002111240
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希望有大神能进行解答
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hz--sym
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可以看下这个帖子siRNA转染讨论-蚂蚁淘论坛
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gelinna
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对的,不过这种时间不好琢磨,不一定是猜想的那样的,建议多做几个组分,48h、72h、96h分别做检测,做这类实验不要忽略转染对细胞照成的影响,一定要设计好对照组,一般情况下转染试剂对细胞的毒性还是很大的,就是si不起效果,也能引起凋亡。不要让转染试剂的毒性照成了实验的假像。我怕做这个用的是Transheep的Namipo转染试剂,毒性可以几乎忽略不计。上面的是3000转的,相比之下细胞活性更好,细胞更亮一点
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