【求助】请问引物稀释时能用漩涡振荡器震荡吗？
2021-08-02
问题描述：
各位网友，大家好！
前几天我在稀释引物时，被老师看到我正在用漩涡振荡器震荡稀释过的100uM的引物，老师说不能强烈震荡，容易把DNA振断，那请问大家该用什么方法充分混匀？
另有一个问题：2OD的引物，是（1）全部稀释成5uM后4度保存还是（2）稀释成100uM先保存，等到用的时候再稀释成5uM？哪个更好？谢谢大家
*请输入10-500个字符
已帮助
0人
0人
kitewu57
用户
溶解引物干燥后的引物质地非常疏松，开盖前最好离心一下，3000-4000转/分钟，1分钟，防止开盖时引物散失。 根据计算出的体积加入适量的无核酸酶的双蒸水（PH>6.0）或TE缓冲液（PH 7.5-8.0），室温放置几分钟，振荡助溶，离心将溶液收集到管底。保存引物引物合成后，经过一系列处理和纯化步骤，旋转干燥而成片状物质。引物在溶解前，室温状态下可以长期保存。没有溶解的引物非常稳定，可以在-20℃下保存至少1年。引物保存在高浓度的状况下比较稳定。如果对实验的重复性要求较高，合成的OD数较大，建议分装，避免反复冻融。修饰荧光引物需要避光保存。引物的浓度溶解好的引物可以事先稀释为100μmoL/L的储存液，分装数份保存于-20℃冰箱，可以保存至少半年以上。使用前，将浓溶液稀释成工作液（10 pmol/ml或20 pmol/ml）后进行实验。 溶解前您需要核对合成报告单和引物标签上的引物OD数是否一致。
已帮助
0人
0人
aquarius
用户1.可以漩涡振荡，引物很短没问题的，超过1Kb以上的最好不要。2.引物稀释，5uM？是不是太低了？我一般先配成100uM的储存液，然后1：5稀释成20uM的工作液，0.25+0.25／25ul体系，终浓度0.2uM。3.反复冻融对引物影响倒不是很大，但是容易污染，所以建议分装。
已帮助
0人
0人
jiuselianhua
用户谢谢各位网友！
▍
相关分类
▍
相关文章
漩涡振荡器的用途和工作原理_解决方案 Instrument
2018测控技术与仪器专业就业方向及就业前景分析_高三网
琥珀酸美托洛尔缓释片(倍他乐克)95mg*7片价格多少钱_作用 ...
在线求助！峰面积的问题_液相色谱（LC）仪器社区论坛
人的端粒酶活性检测ELISA试剂盒性能参数,报价/价格,图片中国生物器...
ELISA双抗原夹心法用于检测_
VWR ®迷你涡旋仪_价格|仪器信息
三维射频消融术和普通射频消融术的区别_有问必答_
Entro
MyBatisGenerator工具生成的类与XML对Oracle数据库模糊 ...
“www.dspharmchem.com”HTTPS检测结果 站长工具
读文献的正确姿势:2014年度儿科Top5
▍
相关问答
