【求助】北京六一的半干电转仪 电转条件
2021-07-24
问题描述:
我们实验室刚买了北京六一的半干电转仪(是有两个碳板作为正副极的那种)
想请教下大家有用过这种仪器么?
效果如果,以及转膜条件是怎样的,请告之,谢谢!
我的蛋白有两个75KD,60KD
急用谢谢先
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popolee
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再次请教
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popolee
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再顶求教中
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shi98
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根据凝胶面积按0.65mA/cm2接通电流,电转移1.5-2小时.
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popolee
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可以用恒压么这样就不用算面积了呵呵有这么做过么大家条件如何?
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blackblues
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我一般也是按1.25mA/cm2的恒流进行电转。普通的Mini胶,如果Spacer的厚度是0.75cm的话,目标蛋白大小约为40kDa,我一般50mA转移30分钟,效果我认为还是很理想的,如果蛋白大可以适当延长转移时间。另外,有的实验室Spacer厚度是1cm,这样胶比较厚,转移时间也应当适当延长。你可根据预染Maker转移的效果判断转移效率。转移时在盆里放上冰,将电转仪放到一个塑料袋中(目的是隔水)放到冰上,然后再在上面也盖上冰,这样可以防止电转过程中的产热。
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