Formulation | 20mMHepes,150mMNaCl,pH7.4 |
Storage | -80°C |
Purity | >95%bySDS-PAGE |
ActivityDetermination | FactorIXclottingassay |
ShelfLife(properlystored) | 12months |
TheactivationoffactorXbytheintrinsicfactorXasecomplexisshown.TheintrinsicfactorXasecomplexconsistsofanenzyme,factorIXa,andacofactor,factorVIIIa,assembledonaphospholipidsurfaceinthepresenceofcalciumions.Theenzymecomplexproteolyticallycleavesa10,000molecularweightactivationpeptidefromtheNH2-terminaloftheheavychainoffactorX,thusexpressingtheactive-siteoffactorXa.
SampleGelInformation:
Gel | Novex4-12%Bis-Tris |
---|---|
Load | HumanFactorIXa,1µgperlane |
Buffer | MOPS |
Standard | SeeBluePlus2;Myosin(191kDa),PhosphorylaseB(97kDa),BSA(64kDa),GlutamicDehydrogenase(51kDa),AlcoholDehydrogenase(39kDa),CarbonicAnhydrase(28kDa),MyoglobinRed(19kDa),Lysozyme(14kDa) |
Overview:
FactorIXaisproducedfromitsinactiveprecursor,factorIX,viaproteolyticcleavagebyfactorXIaorthetissuefactor/factorVIIa/phospholipidcomplex.TheactivationresultsfromthecleavageoftwopeptidebondsinthefactorIXmolecule,releasinganactivationglycopeptidewithanapparentmolecularweightof10,000.TheheavychainoffactorIXa(Mr=28,000)containstheserineproteasecatalyticdomain,whilethelightchain(Mr=17,000)containsthemembranebindingdomain.
FactorIXafunctionsasaserineproteaseinvolvedintheactivationofthezymogen,factorX,toformtheenzyme,factorXa.ThefactorIXaenzymaticactivityisgreatlyenhancedbyinclusionofitscofactor,factorVIIIa,inthepresenceofcalciumionsonaphospholipidsurface.FactorIXaisreADIlyinhibitedbyantithrombinIII,andthisinhibitionisgreatlyacceleratedbythepresenceofheparin.FactorIXaisnotinhibitedbyDFP.
FactorIXaispreparedfromhighlypurifiedfactorIXbyactivationwithfactorXIa,asdescribedbyLindquistetal.(5).ThefactorIXaisfurtherpurifiedbygelfiltration,followedbyimmunoaffinitypurification.FactorIXaisalsoavailablewiththeactivesiteirreversIBLyblockedbythetripeptidechloromethylketone,EGRck,orbythefluorescentinhibitor,Dansyl-EGRck.Itissuppliedin50%(vol/vol)glycerol/H2Oforstorageat-20°C.PurityisassessedbySDS-PAGEanalysis.Activityisdeterminedinaone-stageclottingassay.
Properties:
Localization | Plasma | |||||
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Modeofaction | EnzymecomponentoftheFactorXasecomplex | |||||
Molecularweight | 45,000(7) | |||||
Extinctioncoefficient |
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Structure | 2subunits,Mr=28,000and17,000(5),NH2-terminalgla-domain,twoEGFdomains | |||||
Post-translationalmodifications | oneb-hydroxyaspartate(3),twelveglaresidues(4) |
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1,IgG抗体是抗体中分子量最小的一种,可通过胎盘输给胎儿,保护了婴儿最初六个月内免受感染。该抗体产生晚,维持时间长,消失慢,浓度高。血中检测到可作为远期感染指标。
2,IgM抗体是抗体中分子量最大的一种,不能通过胎盘输给胎儿。抗体产生最早,一经感染,快速产生,在感染初期抗感染起作用。但维持时间短,消失快。
3,灵长类动物主要有四种免疫球蛋白IgG、IgM、IgA、和IgE。
所有用于检测抗原的免疫学方法经适当改良后,均可用于抗体的检测,如IFA、ELISA、RIA、LA......由于抗原方法的敏感性提高和PCR技术的应用,使得HSV抗体在HSV感染个体中的不均一性和不稳定性影响了这类指标在临床诊断中的意义,但作为一种感染有关指标,在一定的范围和情况下,仍有必要进行检测和深入研究.目前HSV特异性抗体的检测,主要有IgG、IgM和IgA三种。
您好,对于优生学检查,有两种抗体,一种是IGG抗体,一种是IGM抗体,如果是前者阳性,只能说明即往以前有感染了这类病原体,而不能说明当前正在感染这个病毒的。
指导意见:
如果是后一种阳性,也就是说IGM抗体阳性时,就提示当前正在感染这个病毒的,需要及时行抗病毒的药物治疗为佳,治好后才行怀孕的,否则对于怀孕的胎儿有很大的影响的。
aware可自测不用抽血祝您健康天 猫!
2-IgM也是一种特异性感染指标,但在人体内持续时间不长(有时是30天更短),往往是传染病的近期感染指标。呈阴性是指:你近期没有感染过结核杆菌。
HSV1型导致的一般都是腰部以上的感染,典型症状是水泡有可能引起脑炎,而且有非活化状态的潜伏。所以我觉得你根本就不用担心这个抗体IgG阳性的化验单。
IgE是确诊过敏的唯一临床指标,人体的免疫细胞目前区分为三类,分别是TH1、TH2和Treg。在健康状态下,TH1和TH2会互相平衡,且共同受到Treg调控。当Treg调控能力不足时或接触到某些蛋白质或细小分子(尘螨花粉或海鲜等食物后,使TH2过度活化,导致 TH2细胞激素分泌量过高,就会帮助B细胞制造较多的过敏抗体IGE,因而出现过敏症状,康敏元抗过敏益生菌主要可调控因过敏而反应过高的TH2型细胞激素分泌量,进而调节免疫细胞活性平衡,可通过增进TH1型免疫反应来调控因过敏而反应过度的TH2型免疫反应的方法。
【过敏性咳嗽血清学IGE检查】
以过敏患者血清作为实验材料的本外试验方法称为血清学试验。其它体液如炎症部位分泌物、渗出物、灌洗液也可采用相同的实验方法进行检测。主要检测项目有总IgE和特异性IgE,即过敏原特异性IgE。
【什么是总IgE?】
IgE即免疫球蛋白E,是I型变态反应病如过敏性鼻炎、过敏性哮喘、异位性皮炎、湿疹、急慢性荨麻疹发病机制中起主要作用的免疫分子,因而在过敏反应的免疫学实验诊断中是首选的检测项目。总IgE是过敏性疾病的特异性检查项目,IgE水平增高提示I型变态反应病的可能性大,但不能用于判断过敏原。
【IgE的特点】
IgE是血清浓度最低的免疫球蛋白 ,只有血清中IgG浓度的万分之一。IgE对热不稳定,是半衰期最短一的免疫球蛋白 ,只有2.8天,与细胞表面结合的IgE半衰期稍长,8~14天,IgE由变应原入侵部位(鼻咽、支气管、胃肠道)的黏膜固有层中的浆细胞合成。在各类免疫球蛋白中,IgE是合成率最低、分解率最高的。属于亲细胞抗体,过敏体质者的胎儿脐带血中IgE浓度可能升高,检测脐血中IgE浓度可用于评估胎儿过敏体质的可能性。
【IgE检测方法】
通常用ELISA方法检测总IgE。由于血清IgE浓度很低,一般酶免疫试验方法的敏感性不足以检出血清IgE,现在常规实验室检测血清IgE的试剂盒采用生物素——抗生物素蛋白 放大的ELISA。试剂盒中所含用于制定标准曲线的IgE标准品和检测结果的IgE浓度单位与其它免疫球蛋白 不同,不是用mg/L表示,而是用u/ml或ku/l表示。
【IgE的正常值(参考范围)】:
血清IgE水平在正常人群中呈偏态分布,即多数人为0或接近于0,IgE水平越高的人数越少。因此计算平均值时应计算几何平均值才能反映其真实情况,即用对数转换后其分布才能近似正态分布。
健康人群血清IgE水平与年龄关系较大,小儿和老年人的IgE水平低于成年人。新生儿血清中IgE水平很低,接近于零。随年龄增长,IgE水平也不断升高,5~7岁后接近正常人水平。按Pharmacia公司提供的参考范围,1个月以内<12KU/L,1岁<11KU/L,2~4岁<33KU/L,5岁以上至成人<85KU/L.
过敏性疾病患者的血清IgE水平可达2000~8000KU/L,当IgE水平高于2000KU/L时应考虑寄生虫感染.
有时血清总IgE水平检测结果为0或参考范围内低值,并不能排除过敏性疾病的可能,须结合临床表现和血清特异性IgE检测结果进行判断.
【什么是特异性IgE检测(sIgE)?】
通常所称的过敏原检测,并非真正检测血液样本中的过敏原分子,而是间接地检测其中针对某种过敏原的特异性IgE分子,特异性IgE检测实际上是检测过敏原特异性IgE,即检测样本中针对某种变应原的特异性IgE,从而间接地判断患者是否对某种过敏原过敏。
环境中常见的过敏原包括以下类别:
寄生虫和微生物:各种螨类(屋尘螨和粉尘螨等)、各种真菌(点青霉、烟曲霉、分枝孢霉、交连孢霉等)、蟑螂。
植物花粉:各种草花粉(豚草、葎草、蒿草)、各种树花粉(桑树、柏树、悬铃木、桦树、榆树、柳树、杨树等)。
动物皮毛:猫、狗、马、鸽子等动物的毛和皮屑。
IgM是免疫球蛋白M(Immunoglobulin M,IgM)的缩写。根据结构的不同将免疫球蛋白分为五种,IgM是人的免疫球蛋白之一,其他还有lgA、lgG、IgD和lgE。
本试验根据《中国药典》2015年版紫外分光光度法吸收系数法进行制定,本试验方法采用的方法学验证内容如下:
1.线性及范围
取IgG标准品配制5个不同浓度被测样品,并进行测定,绘制标准曲线,得到回归方程及范围。
2.准确度
已回收率对准确度进行验证。以已知含量的IgG标准品配制供试品,配制三个浓度,每个浓度平均测定三次。计算回收率。
3.精密度
IgG标准品配制供试品,平行测定六次。
4.溶液稳定性试验
至少持续2h的溶液稳定性考察。
5.干扰试验
空白溶液中加入辅料,在280nm处测定吸收,确定辅料是否对样品的吸收造成干扰。
以上,请大神指正。
补充问题,在专属性验证上,仅做辅料干扰是不是太少了?是否再进行强降解实验呢?因为其中包含了蛋白质A、外源性DNA及宿主细胞蛋白残留。我是否应该针对这三种杂质进行专属性试验?该如何进行呢?
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