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Anaspec/CHRG01; Human β - Defensin 3 (hBD3) Derivative/1 mg/AS-64886
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Anaspec/CHRG01; Human β - Defensin 3 (hBD3) Derivative/1 mg/AS-64886
品牌 / 
Anaspec
货号 / 
AS-64886
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DescriptionSequence(One-Letter Code)
Product NameCHRG01; Human β - Defensin 3 (hBD3) DerivativeKSSTRGRKSSRRKK
Size1 mg
Catalog #AS-64886
US$$81
Purity% Peak Area By HPLC ≥ 95%

CHRG01 is derived from human ?-defensin 3 (hBD3) C-terminal amino acids 54 to 67, with all Cys residues substituted with Ser. This substitution removes all disulfide bond linkages within the sequence. CHRG01, like hBD3, displays electrostatic-dependent antimicrobial properties.

Detailed InformationMaterial Safety Data Sheets (MSDS)
Storage-20°C
ReferencesHoover, D. et al. Antimicrob Agents Chemother 47, 2804 (2003).
Molecular Weight1661.9
KSSTRGRKSSRRKK
Sequence(Three-Letter Code)H - Lys - Ser - Ser - Thr - Arg - Gly - Arg - Lys - Ser - Ser - Arg - Arg - Lys - Lys - OH
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The ribonuclease protection assay (RPA) is a highly sensitive and specific method for the detection of mRNA species. The assay was made possible by the discove 查看更多>
Dissociated Cultures of Cerebellar NeuronsHank Dudek (617-355-4735) Protocol Dissection can do on counter (i.e., in non-sterile conditions)use P8 rat pups, or 查看更多>
Preparation of Poly A+ RNA and Northern AnalysisProcedure (Pharmacia #27-9255-01) Use RNase-free tips and reagents and wear gloves1) Remove organs from six C57 查看更多>
土壤是微生物生活的大本营,它所含微生物无论是数量还是种类都是极其丰富的。因此土壤是微生物多样性的重要场所,是发掘微生物资源的重要基地,可以从中分离、纯化得到许多有价值的菌株。从混杂的微生物群体中获得只含有某一种或某一株微生物的过程称为微生物的分离与纯化。 查看更多>
耐药质粒 DNA转化实验  本实验学习将质粒DNA分子转入大肠杆菌的方法及如何筛选带有质粒DNA的细胞克隆,即转化子。     【原理】  受体菌Ecoli RRI 在低温条件下经Ca++ 处理,可改变细胞膜的通透性,利于受体菌对DNA的摄取,这种经Ca++ 处理的细菌称感受态菌。pBR322 质粒带有氨基苄青霉素( 查看更多>
在提取过程的第一阶段细胞的 RNA 酶应尽快灭活。一旦内源的 RNA 酶被破坏,RNA 受损的可能就大大降低,而纯化的过程就可以按合适的速度进行。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。 查看更多>
由 Marligen Biosciences 提供的 Rapid Total RNA System 可从各种样品中提取 RNA,且产量和质量非常稳定。本实验来源于 PCR 实验指南(第二版),作者:种康,瞿礼嘉。 查看更多>
在土壤、水、空气或人及动、植物体中,不同种类的微生物绝大多数都是混杂生活在一起,当我们希望获得某一种微生物时,就必须从混杂的微生物类群中分离它,以得到只含有这一种微生物的纯培养,这种获得纯培养的方法称为微生物的分离与纯化。 查看更多>
mRNA PurificationI. Prepare oligo-dT celluloseuse 40 mg oligo-dT cellulose / 1 mg total RNA swell oligo dT-cellulose in elution buffer wash oligo dT-cellulose 查看更多>
全血中含有有核白细胞,因此从血液中抽提 RNA 比较方便,但是红细胞富含核糖核酸酶,所以从血液中分离 RNA 奋其持殊的难度。因此若能先将有核白细胞与红细胞分离开来,从血液中抽提 RNA 更易成功。下述方法是酸-酚. 胍法•硫氰酸胍吋裂解细胞,并有效地灭活核糖核酸酶。 查看更多>
We routinely produce dsRNA by in vitro transcription of a PCR generated DNA template containing the T7 promoter sequence on both ends (I. Primer Designed dsRNA 查看更多>
一、质粒DNA的提取及鉴定(一)质粒DNA的提取及鉴定  1.收获细菌  (1)将2ml含相应抗生素的LB液体培养基加入到通气良好的15ml的试管中,接入一单菌落,于37℃剧烈振荡培养过夜。   查看更多>
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求助:最近要提取血浆中的RNA,不知道用哪种试剂好,查了好多资料,有用Trizol,TrizolLS,RNAisoBlood和天根。但我从没做过,求各位大神给点意见。提取的RNA用于qPCR。

主要成分是:NaCl,Tris-HCl(PH=8),EDTA(PH=8),SDS.NaCl,Tris-HCl主要是调节溶液的PH,维持一定的离子浓度。EDTA主要是二价金属离子的螯合剂,使影响DNA的DNA酶中的钙离子和镁离子和EDTA结合,使酶失去活性,有利于提取完整DNA;SDS主要是和蛋白质结合,使其变形沉淀,从而利于DNA的提取,减少和清除带白质杂质!
这个与琼脂糖电泳有关。提取的DNA分子量很大,可能在40K到100K左右。也有可能在这个范围。但普通的琼脂糖电泳。在大分子的时候根本分别不出来。如果你有DL15000的MARKER你就知道,象那个一万与一万五和条带差别很近。
什么公司的DNA提取试剂盒比较好用?
而且比较容易买到,同时提取的DNA便于纯化
请问各位大神,我实验室有这些试剂盒,QIAprepSpinMiniprepKit(250)、AllPrepDNA/RNAMiniKit(50)、QIAampDNAMiniKit、WizardGenomicDNAPurificationKit,请问这几个提DNA的试剂盒有什么不同吗?
有哪些可以提取细胞中病毒DNA的?或者用其他试剂盒提过呢
坐等回复!
RNA干扰(RNA interference, RNAi)是指在进化过程中高度保守的、由双链RNA(double-stranded RNA,dsRNA)诱发的、同源mRNA高效特异性降解的现象。基因沉默,主要有转录前水平的基因沉默(TGS)和转录后水平的基因沉默(PTGS)两类:TGS是指由于DNA修饰或染色体异染色质化等原因使基因不能正常转录;PTGS是启动了细胞质内靶mRNA序列特异性的降解机制。有时转基因会同时导致TGS和PTGS。由于使用RNAi技术可以特异性剔除或关闭特定基因的表达,(长度超过三十的dsRNA会引起干扰素毒性)所以该技术已被广泛用于探索基因功能和传染性疾病及恶性肿瘤的治疗领域。
试剂盒提取RNA123
妞YN4w2021-08-01
看是什么试剂盒,有一些试剂盒是有专门针对性提取的,比如是提取小RNA类的,或者是提取转录组RNA类的,都有,如果是一般的没有说明的那么是总RNA的
大鼠颗粒细胞的提取和细胞中RNA的抽提
总RNA提取试剂盒(TRIzol法)
RIpure试剂是直接从细胞或组织中提取总RNA的试剂。它在破碎和溶解细胞时能保持RNA的完整性。加入氯仿后离心,样品分成水样层和有机层。RNA存在于水样层中。收集上面的的水样层后,RNA可以通过异丙醇沉淀来还原。在除去水样层后,样品中的DNA和蛋白也能相继以沉淀的方式还原。乙醇沉淀能析出中间层的DNA,在有机层中加入异丙醇能沉淀出蛋白。共纯化DNA对于样品间标准化RNA的产量十分有用。
无论是人、动物、植物还是细菌组织,该方法对少量的组织(50-100mg)和细胞(5×106)以及大量的组织(≥1g)和细胞(>107)均有较好的分离效果。TRIPURE试剂操作上的简单性允许同时处理多个的样品。所有的操作可以在一小时内完成。TRIPURE抽提的总RNA能够避免DNA和蛋白的污染。故而能够作RNA印迹分析、斑点杂交、poly(A)+选择、体外翻译、RNA酶保护分析和分子克隆。如果是用于PCR,当两条引物位于单一外显子内时,建议用扩增级的DNase I来处理抽提的总RNA。
TRIpure试剂能促进不同种属不同分子量大小的多种RNA的析出。例如,从大鼠肝脏抽提的RNA琼脂糖凝胶电泳并用溴化乙啶染色,可见许多介于7 kb和15 kb之间不连续的高分子量条带(mRNA和hnRNA成分),两条优势核糖体~5 kb (28S)和~2 kb(18S),低分子量RNA介于0.1和0.3 kb之间 (tRNA, 5S)。当抽提的RNA用TE稀释时其A260/A280比值≥1.8。
试剂准备:使用前先在SEWS-M Wash Solution中加入100 ml 100%的乙醇,混匀。在瓶子上做好标记,密闭储存于室温条件。提取步骤:1. 在样品处理管E中加入至多500 mg的土壤样品2. 将978 μl的Sodium Phosphate Buffer加入到样品处理管E中3. 再加入122 μl的 MT Buffer(为了得到良好的样品处理效果,请在加入土壤样品及两个缓冲液后,在样品处理管中仍能保留有250 – 500μl 空间)4. 将样品置于FastPrep? 仪器上,样品处理条件一般为,时间:40秒,速度:6.0(如果样品需要额外的处理时间,请在间隔期将样品处理管在冰上孵育至少2分钟,以免样品过热)5. 14,000 x g离心5~10分钟(如果把离心时间延长到15分钟,可以更好地使样品量较大的;或者细胞壁结构较复杂的细胞的碎片沉降到管底)6. 将上清转移到一个干净的2.0 ml离心管中。加入250μL的PPS溶液(蛋白质沉淀溶液),用手摇晃10次,使之充分的混合。7. 14,000 x g离心5分钟,将上清转移到一个干净的15ml管中(此处也可使用2Ml管,但使用大管子能获得更好的混合和DNA绑定效果)8. 重悬硅珠(Binding Matrix)溶液,将1.0 ml重悬液加入该15ml管中。9. 使用振荡器或者手动震荡2分钟,将DNA绑定在硅珠上。将管子置于管架上,静置3分钟,使硅珠沉淀下来。10. 小心地移除500μl的上清液,避免吸取到沉淀下来的硅珠。11. 将硅珠在剩余的上清液中重悬。转移约600μl的重悬液至SPIN? Filter中,14,000 x g离心1分钟。弃去接液管中的废液,将15ml管中剩余的重悬液转移到SPIN? Filter再次离心弃去废液。12. 加入500 μl事先准备好的SEWS-M溶液,用枪头轻轻吹打,小心地重悬沉淀。13. 14,000 x g离心1分钟,弃去废液。14. 不加其他溶液,将SPIN? Filter 14,000 x g离心2分钟,除去残留的SEWS-M溶液。弃去接液管,更换一个新的、干净的离心管。15. 将SPIN? Filter置于室温下晾干5分钟16.轻轻地用50-100 μl 的DES溶液(或者无菌/无DNA酶的水)重悬SPIN filter上的硅珠(为了避免过度稀释纯化出的DNA,请尽量减少DES溶液的量,55?C孵育5分钟能帮助提高纯化产物的得率)17. 14,000 x g离心1分钟使溶解的DNA转移到接液管中。弃去SPIN? Filter(得到的纯化产物可直接用于PCR等其他下游的操作,4°C使用前保存或者-20°C长期保存。)技术优势
能有效的处理土壤样品中一些很难处理的组分如: 真细菌孢子(eubacterial spores)、内芽孢(endospores)、格兰仕阳性菌(gram positive bacteria)、酵母(yeast)、线虫(nematodes)、海藻(algea)、真菌(fungi)等。2. 样品处理过程中使用的 MT Buffer和Sodium Phosphate Buffer可在整个提取过程中有效的保护核酸,并最大限度的降低RNA污染。3. 基于硅珠的纯化方法,可有效地去除腐植酸、多元酚等PCR抑制物4. 纯化所得的DNA可直接用于PCR、酶切都后续实验之中。5. 对腐植酸含量特别高的样品,附加额外的处理方法。注:对于去除腐植酸的方法在使用以下任何一种方法之前,请预先准备5.5M的异硫氰酸胍(Guanidine Thiocyanate)溶液方法A:1.当操作到土壤DNA提取试剂盒的第九步时,使用14,000 x g (~约5秒)的短时离心替代硅珠的自然沉降,移除上清。2.用1ml事先准备好的异硫氰酸胍溶液洗涤、重悬硅珠。3.14,000 x g (~约5秒)短时离心该离心管,除去上清。4.重复上述的洗涤步骤,直到硅珠恢复到原先的颜色。5.最后一次洗涤之后,用1ml的异硫氰酸胍溶液重悬硅珠,将600μl重悬液转移到SPIN filter里,14,000 x g离心1分钟。6.移除接液管中的废液,将剩余的重悬液转移至SPIN filter里,14,000 x g离心1分钟,弃去废液。7.从提取试剂盒操作说明的第十二步开始继续操作。方法B:1.将下列成分混合于1.5ml的离心管中,组成腐植酸洗涤液:978 μl Sodium Phosphate Buffer122 μl MT Buffer250 μl PPS2.充分混匀后,全速离心1分钟,将上清转移到一个新的离心管中(容量大于或等于2ml)3.加入等体积的5.5M的异硫氰酸胍溶液、混匀。4.完成了土壤试剂盒操作说明中的第九步后,将500μl的腐植酸洗涤液加入SPIN filter5.14,000 x g离心1分钟,弃去废液。6.重复上述的洗涤步骤,直到硅珠恢复到原先的颜色。7.从提取试剂盒操作说明的第十二步开始继续操作。
TRIpure 试剂是直接从细胞或组织中提取总RNA的试剂。它在破碎和溶解细胞时能保持RNA的完整性。加入氯仿后离心,样品分成水样层和有机层。RNA存在于水样层中。收集上面的的水样层后,RNA可以通过异丙醇沉淀来还原。在除去水样层后,样品中的DNA和蛋白也能相继以沉淀的方式还原。乙醇沉淀能析出中间层的DNA,在有机层中加入异丙醇能沉淀出蛋白。共纯化DNA对于样品间标准化RNA的产量十分有用。 无论是人、动物、植物还是细菌组织,该方法对少量的组织(50-100mg)和细胞(5×106)以及大量的组织(≥1g)和细胞(>107)均有较好的分离效果。TRIpure 试剂操作上的简单性允许同时处理多个的样品。所有的操作可以在一小时内完成。TRIpure抽提的总RNA能够避免DNA和蛋白的污染。故而能够作RNA印迹分析、斑点杂交、poly(A)+选择、体外翻译、RNA酶保护分析和分子克隆。如果是用于PCR,当两条引物位于单一外显子内时,建议用扩增级的DNase I来处理抽提的总RNA。并用溴化乙啶染色,可见许多介于7 kb和15 kb之间不连续的高分子量条带(mRNA和hnRNA成分),两条优势核糖体~5 kb (28S)和~2 kb(18S),低分子量RNA介于0.1和0.3 kb之间 (tRNA, 5S)。当抽提的RNA用TE稀释时其A260/A280比值≥1.8。 TRIpure 试剂能促进不同种属不同分子量大小的多种RNA的析出。例如,从大鼠肝脏抽提的RNA琼脂糖凝胶电泳A260/A280比值≥1.8。

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RNA提取对于科研人员来说并不陌生,但是要得到好的结果却不是一件很容易的事情。事实上,现在市面上的丰富的RNA提取试剂基本上可以满足科研人员的需要,为什么往往提取的RNA却容易失败呢?

RNA提取失败的主要现象有三个:提取的RNA降解、提取的RNA量偏低以及提取的RNA纯度低。究竟怎样才能确保RNA提取的成功率呢?

首先,要确定材料的可用性。尽管现有的RNA提取试剂都用抑制RNase的成分,但提取的材料仍需谨慎处理。提取的材料的新鲜度是获取完整RNA的关键,但是由于种种原因无法立即从新鲜材料中提取RNA时,使用Takara公司的样品保护剂SampleProtectorforRNA/DNA可以免去使用液氮或超低温冰箱的不便,同时也可以有效解决组织、细胞样品的短时间保存及运输问题。此外,如果将不同时期收集的样品都预先存放于本试剂中,可以做到立即终止并固定RNA表达的时序变化,减少实验组间的误差。

其次,选择合适的提取试剂是最重要的一步。好的提取试剂在确保成功的同时,操作方便且经济实用。对于动物组织、简单的植物材料、各种微生物、培养细胞的totalRNA提取,Takara公司的RNAisoPlus具有诸多的成功案例。随着2013年7月柱型提取试剂TaKaRaMiniBESTUniversalTotalRNAExtractionKit的成功上市,进一步丰富了TakaraRNA提取的产品线。该产品采用了独特的细胞裂解系统,无需苯酚氯仿抽提等步骤,简单快捷。组织或细胞裂解后,提取操作仅需20分钟便可完成。

对于富含多糖多酚的植物类组织提取是个难点,Takara精心研发的柱型提取试剂TaKaRaMiniBESTPlantRNAExtractionKit可以轻松解决这个问题。TaKaRaMiniBESTPlantRNAExtractionKit可以高效地从各种简单的植物组织材料(叶片、茎、幼苗等)、富含多糖多酚的植物组织材料(果实、种子等)、真菌提取高纯度的TotalRNA,适用范围广泛。按照标准流程,本试剂盒可以有效地提取分子量大于200nt的RNA,也可以按照可选步骤提取得到包含SmallRNA(<200nt)的TotalRNA。试剂盒中包含了RNA提取所需的全部试剂,无需额外购买其它试剂


这两个方法有什么区别?那个比较好?有什么要主意的吗?

提取试剂盒的详细步骤是什么?
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