酵母菌RNA制备实验一基本方案（热酸性酚抽提法）
| 实验材料 | 酵母菌 试剂、试剂盒 | TES酸性酚氯仿乙酸钠乙醇 仪器、耗材 | 离心管离心机摇床 实验步骤 | 1. 酵母细胞在10ml培养基中生长至指数中期（OD600=1.0）。 2. 将培养液转移到50ml，离心管，于4℃，1500g离心3min。 3. 弃上清，菌体沉淀用1ml冰冷的水重悬，转移至一个干净的1.5ml微量离心管中，4℃离心10s，弃上清，继续步骤4。需要时，将离心管置于干冰上速冻。 4. 用400μlTSE溶液重悬细胞沉淀，加400μl酸性酚，激烈振荡10s，65℃温育30~60min，不时用旋涡振荡器短暂振荡。 5. 冰浴放置5min，4℃高速离心5min。 6. 水（上）相移到一个干净的1.5ml微量离心管中，加400μl酸性酚，激烈振荡，重复步骤5。 7. 将水相移到一个干净的1.5ml微量离心管中，加入400μl氯仿，激烈振荡，4℃高速离心5min。 8. 将水相移到一个新管中，加40μl3mol/l乙酸钠，pH5.3及1ml冰冷的无水乙醇沉淀，4℃高速离心5min，在冰冷的70%乙醇中快速振荡以洗涤RNA沉淀。如上离心以沉淀RNA。 9. 沉淀用50μl水重溶，用分光光度法测A260及A280以确定浓度，于-70℃或-20℃贮存，可使用1年。 注意事项 | 不要用高浓度的细胞制备RNA，因为进入静止期后，结果的一致性差，RNA产量不稳定。 |
|---|
免责声明 本文仅代表作者个人观点，与本网无关。其创作性以及文中陈述文字和内容未经本站证实，对本文以及其中全部或者部分内容、文字的真实性、完整性、及时性本站不做任何保证或承诺，请读者仅作参考，并请自行核实相关内容。
版权声明 未经蚂蚁淘授权不得转载、摘编或利用其他方式使用上述作品。已经经本网授权使用作品的，应该授权范围内使用，并注明“来源：蚂蚁淘”。违反上述声明者，本网将追究其相关法律责任。
发布于 ： 2021-08-15
阅读（168）
▍
相关分类
▍
相关文章
长白猪精原细胞的分离和纯化
Opal Company manufactures sophisticate..._
northern blotting ,southern blotting ,western blotting 的联系与...
生物安全柜需要有仪器使用记录吗 分析行业新闻
Nayan Guo 英国伦敦大学 伦敦国王学院 中国 | LinkedIn
Cell Staining Buffer_价格厂家供应商_博奥_
ExpressionL19usingPichiapastoris
Dharmacon>>siDESIGN 中心 南京生兴生物技术有限公司_...
链霉亲和素可以提高融合率的原因 | 吉至试剂
各级分蔗糖酶活性测定 及纯化率的计算实验 实验方法
...RTPCR Strategy for Quantitative Evaluation of the Expression...
Thảm tập yoga Liforme truyền thống 4.2mm chính hãng| Đồ ...
