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Zyagen/Equine Tissue Premade Western Blot/11472/1 Ea
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Zyagen/Equine Tissue Premade Western Blot/11472/1 Ea
品牌 / 
Zyagen Laboratories
货号 / 
11472
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EquinetissueWesternblotsaremade ofhighqualitytotalproteinsextractedfromfreshlyharvested19differenthorsetissues(Panel#1). Proteinsamplearesubjectedtorigorousqualitycontrolprocedures.
 
Blotscanbeusedto:
  • Quicklyassessspecificproteinexpressionacrossdifferenttissues.
  • Determinesizeandrelativeabundanceofprotein indifferenttissues.
Qualitycontrol:
Everystepofpreparationofblots,fromharvestingtissuesandextractionofproteintoblottingiscarefullymonitoredtoensurethesuperiorqualityandperformance.
  • Blotsaremadefromhighqualitytissuelysatesthatishomogenizedinaproteinlysisbuffercontainingcocktailof7mammalianproteaseinhibitors.Thequalityofproteinasindicatedbytheabsenceofsmear(nodegradation)andsharpnessandresolutionofproteinbandsareverifiedbydenaturedSDS-PAGEwithCoomassiebluestaining.
  • TheefficiencyoftransferisroutinelycheckedbystainingproteinonmembraneswithreversIBLePonceaustaining.
  • Theintegrityoftheblottedproteinistestedbyimmunostainingof b-actin.
Description:
Thetotalprotein samples  (75ugeach) arefreshlyextractedfrom tissues,boiledinSDSsamplebuffer,fractionatedthough12.5%SDS-denaturinglargepolyacralamidegeleletrophoresis(SDSPAGE), andblottedontoPVDFmembranes.Eachblotisshippedinasealedbagatroomtemperatureandisgoodforoneyearifproperlystoreddryat4oCinasealedbagwithdescant.
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ImmunoWay生物的使命是用更好的产品和服务来帮助世界各地的生命科学的研究者,简化并加速他们的研究。专注于开发出创新的和可靠的免疫学和细胞学产品。ImmunoWay生物是开发高品质的与癌症、细胞凋亡、细胞生长和信号转导相关的ELISA试剂盒,细胞凋亡检测试剂盒,细胞代谢检测试剂盒,抗体,抗体/蛋白芯片的先驱。公司目前有八千多种抗体,其中信号传导相关的抗体1200 查看更多>
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蛋白质免疫印迹(Western Blot )可以:(1)从蛋白质混合物中检出目标蛋白质;(2)定量或定性确定细胞或组织中蛋白质的表达情况;(3)用于蛋白质-蛋白质、蛋白质-DNA、蛋白质-RNA相互作用后续分析。 查看更多>
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通过前期的早期初筛,经过生物信息学分析,会筛选到具有统计学意义的一部分具有表达差异的蛋白。这些蛋白需要经过进一步的优化,寻找到与疾病或某些通路有关的具有表达差异的蛋白,进一步缩小蛋白范围,这时就需要使用结果更为准确的蛋白定量或鉴定工具。经过优化后,需要对得到的更小范围生物标志物进行大样本量的验证,最终确定哪些生物标志物可以用于疾病 查看更多>
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α-平滑肌肌动蛋白是23kD。
  1、如果是提取的总蛋白,然后做WB,用β-actin或者GAPDH做内参肯定是没有问题的,这是公认的东西。
  2、如果用膜蛋白提取试剂盒提取蛋白,再用β-actin作为内参似乎不妥,因为理论上来讲β-actin在膜上是不表达的。WB能做出β-actin来是因为膜蛋白提取时把胞质蛋白也提出来了。然而,如果我们试验目的是用药物处理细胞,比较处理前后某种膜蛋白的表达情况,此时用膜蛋白提取试剂盒提取膜蛋白后再用β-actin做内参似乎就不妥了,因为你根本不知道药物处理前后混杂了多少的胞质蛋白进来。如果没有胞质蛋白混进去的话,β-actin就是检测不到的。
这个膜的两面是不一样的。一面粗糙,一面光滑吧。如果这个算正反面的话,那么就是有正反面的。但是对于WB来说在转膜前是没有正反面之分的。你用粗糙的面贴着胶转膜和光滑的面贴着胶转膜,蛋白都能转到膜上去的。不会因为你膜贴反了而蛋白转膜不成功啥的。
转膜后就要区分与胶接触的一面与另一面了。话说楼主好奇的话可以跑蛋白的试试看哈。比如目的蛋白的胶用光滑面贴着胶,内参蛋白用粗糙面贴着胶一起转膜试试转膜结果看看呢。
电泳液和转膜液都可重复利用3次左右
考马斯亮兰染液也可以重复用。新配的染液10分钟即可,重复3次后要染30分钟。
一抗二抗可以重复利用,但是注意要在5%milk中加入0.2% sodium azide ,并且用完以后放入4度保存,我的经验重复使用4-5次是肯定没有问题的.如果保存不当,就会污染微生物,只能丢弃.
因为线粒体蛋白是细胞亚显微结构,必须用电镜观察,可以用,免疫电镜技术,和电镜放射自显影技术.推荐第二种:1放射性同位素标记的生物大分子前体参入,2,常规方法制片,3,在样品上敷上一层溴化银乳胶(要求更严格),在暗室里曝光数天(时间更长),经显影定影后,4移至电镜下观察,银颗粒所在位置即放射同位素标记的位置.
timp可以做elisa,因为有专门的elisa试剂盒是用于检测timp,所以是可以用elisa方法进行检测的!
我现在在用WB检测APP蛋白,但是总是不成功,不知道是否是蛋白提取有问题,因为APP蛋白是膜蛋白,我用的是总蛋白提取试剂盒,希望有经验的同志指点一下。谢谢!
浓缩胶的目的使得loading的样品能够在同一条水平线上进入分离胶,如果电压太大前端的蛋白容易在后面的蛋白赶上来前进入分离胶。而在分离是理论上(实际上也是)小电压长时间分离的效果会更好,但是在操作过程中没...
尿素,又称碳酰胺(carbamide),是由碳、氧、氨基组成的有机化合物,是一种白色晶体。最简单的有机化合物之一,是哺乳动物和某些鱼类体内蛋白质代谢分解的主要含氮终产物。也是目前含氮量最高的氮肥。作为一种中性肥料,尿素适用于各种土壤和植物。它易保存,使用方便,对土壤的破坏作用小,是目前使用量较大的一种化学氮肥。工业上用氨气和二氧化碳在一定条件下合成尿素。尿素可与酸作用生成盐。有水解作用。在高温下可进行缩合反应,生成缩二脲、缩三脲和三聚氰酸。加热至160℃分解,产生氨气同时变为异氰酸。因为在人尿中含有这种物质,所以
取名尿素。尿素含氮46%,是固体氮肥中含氮量最高的。尿素在酸、碱、酶作用下(酸、碱需加热)能水解生成氨和二氧化碳。希望我能帮助你解疑释惑。
需要根据具体情况进行具体分析,推荐从以下角度进行分析:对细胞表达目的蛋白的时间进行梯度设计,分别取样然后做SDS-PAGEWB分析;参考实验室经验数据;尝试采用磁珠IP试剂盒产品(义翘有相关产品)进行小量样品的快速纯化;…
如题,有没有人用过SignalBoostTM免疫信号增强试剂盒,到底好不好用,效果真有说明书上说的那么好吗
要检测Foxp3如何选择WB的试剂盒,什么叫稀释倍数呢。这个试剂盒里一般都有什么。国内与国外应该质量差不多吧,我中山的怎么样
买了南京凯基的膜蛋白和浆蛋白提取试剂盒,浆蛋白有条带,可是膜蛋白跑了很久没跑出过条带。。。
之前是担心所需组织量不够(要求是200-300mg,我的组织只有20mg左右)才跑不出来,后来换用大鼠心脏测试,组织量绝对够。。。而且在跑western之前进行了说明书上的蛋白浓缩步骤,可是在加loADIngbuffer之后,蛋白沉淀怎么都溶解不掉~说明书也注明了如果有沉淀可以取上清继续上样,可是每次上样感觉样品往上浮,只有部分样品往孔里沉,而且跑出来什么都没有,连内参都没有。用的是β-actin的内参。。
western之前浓缩步骤如下:
1、取所得提取物,每100ul膜蛋白加入约300ul的溶解buffer和约100ul三氯乙酸(TCA)试剂,混匀后置冰上20-30min后,13000rpm,离心15min,尽可能去除上清。
2、沉淀加入1ml丙酮,室温静置10min后,13000rpm离心15min。
3、弃上清,沉淀真空旋干或置冰上干燥10min(敞开离心管盖),按适当体积比加入loadingbuffer(使用前没100ulloadingbuffer加入2-5ulβ-巯基乙醇)溶解,彻底分散(枪头反复吹吸或剧烈涡旋),煮沸5min。【注:加入loadingbuffer后如有部分难容物,可取上清继续上样。】
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