细菌基础培养基制备实验一固体培养基
| 实验方法原理 | 培养基是人工合成的一种混合营养料，用于分离培养细菌。常用的有基础培养基、营养培养基、鉴别培养基、选择培养基等。 | ||||
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| 试剂、试剂盒 | 牛肉膏蛋白胨氯化钠蒸馏水琼脂NaOH酚红指示剂 仪器、耗材 | pH试纸三角烧瓶量筒天平吸管 实验步骤 | 一、普通琼脂培养基 于pH7.6－7.8的肉膏汤中加入2%－3%琼脂，加热溶化（必要时用脱脂棉过滤后再补足水分）适量分装于适当的试管或三角烧瓶中，塞上硅胶塞并用牛皮纸包扎，置高压灭菌器内103.4kpa、121.3℃、20分钟灭菌。 1. 琼脂斜面：分装于试管中的琼脂培养基，由高压灭菌器内取出后，趁热将试管斜置冷凝后即成琼脂斜面（或称普通斜面）。 2. 琼脂平板：分装于烧瓶中的琼脂培养基，由灭菌器内取出后，待冷却至50－60℃时，以无菌操作倾入无菌平皿内（直径9cm的平皿，约需13－15ml琼脂培养基），冷凝后即成琼脂平板（或称普通平板）。 二、血液琼脂培养基 有些细菌营养要求较高，在普通琼脂培养基生长不良，可用血液琼脂培养基进行培养。将已灭菌的琼脂培养基于50℃时，以无菌操作加入无菌的5%－10%脱纤维羊血（或兔血），摇匀后分装于无菌试管，斜置冷凝后即成血液琼脂斜面；分装于无菌平皿，摇匀后冷凝即成血液琼脂平板（简称血平板）。将以上固体培养基（平板应底朝上）放入37℃温箱24小时培养，如无菌生长，放凉后即可保存冰箱备用。平板可用于细菌分离培养，斜面可用于增菌和保存菌种等。 三、半固体培养基 于pH7.6的肉膏汤种加入0.3%－0.5%琼脂，加热溶化，脱脂棉过滤后补足水分，适量分装于试管内，经103.4kpa、121.3℃、20分钟高压灭菌，取出直立，待琼脂凝固后，即成为半固体培养基，37℃温箱培养24小时无菌生长，即可应用。常用于观察细菌动力和保存菌种。 |
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发布于 ： 2018-08-06
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