【求助】RNA干扰中转染细胞的筛选
2021-07-27
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leijun7709123
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你做转染的目的是什么,没说清楚,别人不好判断!
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ahdongyh
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你是不是想筛那些稳转的细胞系啊!如果是的话那就看你的质粒上是什么抗性了,很多都是NeoR基因的,也就是能抗G418,通过一定浓度的G418去筛。另外质粒上如果有GFP,看荧光有无好了。选定目的细胞,有限稀释拿到细胞单克隆并验证,这个时间的确是很长的,如果你用的细胞娇贵那就更长了,如果像3T3那样,就容易多了。
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你是不是想筛那些稳转的细胞系啊!如果是的话那就看你的质粒上是什么抗性了,很多都是NeoR基因的,也就是能抗G418,通过一定浓度的G418去筛。另外质粒上如果有GFP,看荧光有无好了。选定目的细胞,有限稀释拿到细胞单克隆并验证,这个时间的确是很长的,如果你用的细胞娇贵那就更长了,如果像3T3那样,就容易多了。
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ahdongyh
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你是不是想筛那些稳转的细胞系啊!如果是的话那就看你的质粒上是什么抗性了,很多都是NeoR基因的,也就是能抗G418,通过一定浓度的G418去筛。另外质粒上如果有GFP,看荧光有无好了。选定目的细胞,有限稀释拿到细胞单克隆并验证,这个时间的确是很长的,如果你用的细胞娇贵那就更长了,如果像3T3那样,就容易多了。
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