Product Name | SMCC Activated R-PE (R-Phycoerythrin) |
Size | 1 mg |
Catalog # | AS-72110 |
US$ | $147 |
R-Phycoerythrin (R-PE), a fluorescent protein from phycobiliprotein family, is isolated from red algae. SMCC Activated R-PE is chemically modified with SMCC. SMCC reacts with the primary amine on R-PE and introduces maleimide groups to R-PE. These maleimide groups easily react with thiol groups of target protein without the need for any additional activation, resulting in convenient conjugation of R-PE with proteins. R-PEs primary absorption peak is at 565 nm with secondary peaks at 496 and 545 nm. The broad excitation spectrum provides the advantage for multi-color immunofluorescent staining or cell sorting. R-PE and the closely related BPE are the most intensely fluorescent phycobiliproteins with orange fluorescence. They are significantly brighter and more photostable than conventional organic fluorophores. R-PE conjugates are widely used in applications such as flow cytometry, live cell staining, and immunofluorescent staining. | |
Detailed Information | DatasheetMaterial Safety Data Sheets (MSDS) |
Storage | 4°C, Do NOT freeze! |
References | Huang B, et al. (2002). The experimental research of R-phycoerythrin subunits on cancer treatment: a new photosensitizer in PDT. Cancer Biother Radiopharm 17, 35-42. Galland-Irmouli AV, et al. (2000). One-step purification of R-phycoerythrin from the red macroalga Palmaria palmata using preparative polyacrylamide gel electrophoresis. J Chromatogr B Biomed Sci Appl 739, 117-23. |
Spectral Properties | Abs/Em = 565/575 nm |
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Western、IP 等。主要成分为50mM Tris (pH7.4),150mM NaCl,1% NP-40, 0.1% SDS。
使用本品裂解得到的蛋白样品,可以用BCA 蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度。由于含有
较高浓度的去垢剂,不能用Bradford 法测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。
保存条件:4℃
制备细胞裂解产物:
1、800g 4℃离心5 分钟,收集细胞,估计细胞离心后的体积(PCV,106 cells ≈ 20ul PCV,
107 cells ≈ 100 ul PCV)
2、每50~100ul PCV 加入5 倍体积的蛋白裂解液(250~500ul),冰浴中放置10 分钟,且每隔5
分钟在漩涡混合仪震荡30 秒;
3、12000g 4℃离心10 分钟,将上清转移到新的离心管中,即得细胞总蛋白产物;
4、假如所得蛋白产物较为粘稠,可95℃加热5 分钟,然后迅速冰浴5 分钟,12000g 4℃离心
10 分钟,将上清转移到新的离心管中,即得细胞总蛋白产物。
制备组织裂解产物:
1、取50-100mg 组织在冰上剪成碎片,用预冷的PBS 洗涤2 次,离心弃去PBS;
2、加入0.5-1ml 预冷的蛋白裂解液;
3、4℃用玻璃匀浆器匀浆20-40 次,直到95%的细胞被破碎,然后在冰浴中放置10 分钟,且每
隔5 分钟在漩涡混合仪震荡30 秒;
4、12000g 4℃离心10 分钟,将上清转移到新的离心管中,即得组织总蛋白产物;
5、假如所得蛋白产物较为粘稠,可95℃加热5 分钟,然后迅速冰浴5 分钟,12000g 4℃离心
10 分钟,将上清转移到新的离心管中,即得组织总蛋白产物。
6、20%的甘油保存于-70℃或-20℃。
常规的96孔板振荡器是作平面圆周运转的
要作PCR板离心漩涡振荡的话,转速建议不要低于2800rpm的。
如果你们现有的振荡器达不到条件的话,建议选和我们一样的仪器,我们选用时是德谱仪器给我们推荐的,他们家好像有多款可选的。
望采纳哦
2.溶氧,在好氧培养过程中,空气是滤过开放的,所以通过摇到可以让更多空气中氧气溶解于发酵液中。
厌氧则不是这个作用了。
3.体系均一,有便于对不同参数的取样测定。
1-5号蛋白浓度分别是(ug/ul):0.71.12.11.64.8
1-3号为一种细胞,4和5号为LO2细胞
1-4号采用同一种方法提取蛋白,5号采用的是另一种方法
问题:4号比5号的蛋白浓度高很多,但是条带还没没5号的明显??
4号和5号为什么会有拖尾尤其是4号,而1-3号则是条带太少(只有3条)
2、筛框:由松木或变形量。
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前几天我在稀释引物时,被老师看到我正在用漩涡振荡器震荡稀释过的100uM的引物,老师说不能强烈震荡,容易把DNA振断,那请问大家该用什么方法充分混匀?
另有一个问题:2OD的引物,是(1)全部稀释成5uM后4度保存还是(2)稀释成100uM先保存,等到用的时候再稀释成5uM?哪个更好?谢谢大家
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