产品货号 | C6005S | C6005M | C6005L | C6005XL | C6005XXL |
产品规格 | 100T | 500T | 3000T | 10000T | 5×10000T |
组分 | 1 mL | 5 mL | 30 mL | 100 mL | 5×100 mL |
1.细胞数量过低,建议增加细胞待测数量;2.染色难度大,建议增加CCK-8孵育时间◆数据重复性差?1.孔板最外圈试剂容易挥发,建议最外一圈的孔只加培养基,不作为测定孔用;2.CCK-8沾壁,建议加入CCK-8后,轻轻敲击培养板以帮助混匀;3.细胞数量过多或过少,建议预先在1000-100000个/孔范围内摸索条件;4.孔内气泡干扰酶标仪检测,检测前需确保每个孔内无气泡◆在做细胞的加药实验时,药物对CCK-8测定是否有影响?1.注意如果药物具有还原性(如维生素C),会和CCK-8发生显色反应,增加吸光度;2.药物中的金属对CCK-8显色有影响:当终浓度为1mM的氯化亚铅、氧化铁、硫酸铜会抑制5%,15%, 90%的显色反应,使灵敏度降级。如果终浓度是10mM的话,将会100%抑制。解决办法:首先要确认药物是否有吸收,在含有药物的培养基中加入CCK-8,测定450nm的吸光度,如果它的吸光度比不含药物的培养基(加CCK-8)的吸光度高,则证明药物有影响,可在加CCK-8之前更换培养基,去掉药物的影响;3.由于培养基中可能含有氧化还原反应的物质,在正式实验之前,建议使用一个孔作一下检测,有必要先确认培养基和CCK-8是否反应,一般正常的OD值应该在0.4以下◆可否采用CCK-8法进行药物的IC50检测?可以,将细胞培养后按照不同浓度的药物处理一定时间后进行CCK-8检测,根据吸光度绘制曲线,计算该药物抑制细胞数量一半时的浓度(IC50)◆CCK-8对于不同的细胞,灵敏度是否一样?不一样,悬浮细胞较贴壁细胞难染色。对于贴壁细胞,一般加入CCK-8培养1-4小时吸光度已经很高,但对于悬浮细胞则可能吸光度较低,可以通过延长CCK-8的加入时间或增加细胞数量来解决◆若是暂不检测OD值,该如何处理?若暂时不测定 OD 值,可以向每孔中加入 10μL 0.1 M 的 HCl 溶液或者 1% w/v SDS 溶液,并遮盖培养板避光保存在室温条件下。24 小时内测定,吸光度不会发生变化◆用CCK-8测细胞活力时每次都要做标准曲线吗?建议每次做,虽然细胞是一样的,但是细胞的状态不一定一样。对于状态不一样的细胞,建议每次做标准曲线
22.Biomimetic Nanoparticles Carrying Repolarization Agent of Tumor-Associated Macrophages for Remodeling of the Inflammatory Microenvironment Following Photothermal TherapyYale Yue,Fenfen Li,Yao Li,Yazhou Wang,Xinjing Guo,Zhaoxia Cheng,Nan Li,Xiaotu Ma,Guangjun Nie,Xiao ZhaoACS Nano
23.Taxifolin, an Inhibitor of Sortase A, Interferes With the Adhesion of Methicillin-Resistant Staphylococcal aureusLi Wang,Guangming Wang,Han Qu,Kai Wang,Shisong Jing,Shuhan Guan,Liyan Su,Qianxue Li,Dacheng WangSuggest a Research Topic 24.Targeted Mitochondrial Fluorescence Imaging-Guided TumorAntimetabolic Therapy with the Imprinted Polymer NanomedicineCapable of Specifically Recognizing Dihydrofolate Reductase
Ya-Ting Qin,Yao-Jia Ma,Yu-Sheng Feng,Xi-Wen He,Wen-You Li,Yu-Kui Zhang
ACS Applied Materials & Interfaces 25.PDGF-BB/SA/Dex injectable hydrogels accelerate BMSC-mediated functional full thickness skin wound repair by promoting angiogenesis Zhenkun Zhang,Zhe Li,Yingying Wang,Qianqian Wang,Minghao Yao,Liang Zhao,Jijing Shi,Fangxia Guan,Shanshan Ma Joural of Materials Chemistory B 26.Molecular subtypes based on CNVs related gene signatures identify candidate prognostic biomarkers in lung adenocarcinomaBaihui Li,Ziqi Huang,Wenwen Yu,Shaochuan Liu,Jian Zhang,Qingqing Wang,Lei Wu,Fan Kou,Lili YangNeoplasia Volume23,Issue 7,July 2021,Page 704-717 27.Injectable bone cement with magnesium-containing microspheres enhances osteogenesis via anti-inflammatory immunoregulationShenglong Tan,Yifan Wang,Yingying Du,Yin Xiao,Shengmin Zhang Bioactive MaterialsVolume 6, Issue 10,October 2021, Pages 3411-3423
28.Antiepileptic Effects of Cicadae Periostracum on Mice and Its Antiapoptotic Effects in H2O2-Stimulated PC12 Cells via Regulation of PI3K/Akt/Nrf2 Signaling Pathways
Qing Zhang,Ruo-Lan Li,Ting Tao,Jia-Yi Sun,Jia Liu,Ting Zhang,Wei Peng,Chun-Jie WuVolume2021 29.AGT serves as a potential biomarker and drives tumor progression incolorectal carcinomaWei Chen,Yihuan Chen,Kai Zhang,Wanjing Yang,Xiang Li,Jun Zhao,Kangdong Liu,Ziming Dong,Jing LuInternational Immunopharmacology30.Superlow Dosage of Intrinsically Bioactive Zinc Metal–Organic Frameworks to Modulate Endothelial Cell Morphogenesis and Significantly Rescue Ischemic DiseaseBin Gao,Xiaoyu Wang,Meiyu Wang,Kexin You,Gasim Sebit Ahmed Suleiman,Xiang-Kui Ren,Jintang Guo,Shihai Xia,Wencheng Zhang,Yakai FengACS Nano参考文献1.Near-infrared upconversion–activated CRISPR-Cas9 system: A remote-controlled gene editing platform应用方向:细胞活力检测:A549细胞
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请教各位前辈:流式细胞分析技术检测细胞周期和细胞凋亡的变化,是不是一般都是用AnnexinV-PI试剂的?据说这个比较贵是吗?有其他的可以代替吗?
1 mmol/LEDTA(pH 8.0)
因为含有以上两种物质,所以称为TE。
配制分三步:
1)1 M Tris-HCl (pH 8.0) 50 ml的配制:称取Tris碱6.06 g,加超纯水40 ml溶解,滴加浓HCl约2.1 ml调pH至8.0,定容至50 ml。
2)0.5 M EDTA(pH 8.0)50 ml的配制:称取EDTA-Na2·2H2O 9.306 g,加超纯水35 ml,剧烈搅拌,用约1 g NaOH颗粒调pH至8.0,定容至50 ml。(EDTA二钠盐需加入NaOH将pH调至接近8.0时,才会溶解。)
3)1×TE(10 mM Tris-HCl,pH 8.0;1 mM EDTA,pH 8.0)的配制:
作用:
TE缓冲液是弱碱性,对DNA的碱基有保护性,(DNA在它是的稳定性较好,不易破坏其完整性或产生开环及断裂),包括提取好的DNA也要放在TE缓冲液是保存. 10mMTris-Hcl,pH有7.47.68.0三种。
EDTA调到8.0是为了更好溶解,其他只要调到相应pH就可以。Tris在7-8附近缓冲能力很强,所以加8.0的EDTA下去后,不会改变pH。
然后你得确定,这个细胞株对于你得研究来说不可或缺,具有明确的代表性。
上面两个都没有问题的话,祝你顺利。
我的步骤:
1、16-22天小鼠颈椎脱臼法处死后,75%酒精浸泡30秒消毒,睾丸取出后置预冷PBS,40分钟(路上所需时间)后开始处理。
2、剔除白膜,剪碎睾丸。0.25%胰酶(含edta)1.5ml/个睾丸37°C消化30-50分钟,等体积DMEM/F12含10%FBS终止消化,1000r/MIN离心5分钟,弃上液。
3、加0.1%胶原酶消化30分钟,过200目网筛,1000r/MIN离心5分钟,弃上液。
4、DMEM/F12含10%FBS5ml重悬后转如培养瓶,入孵育箱37°C5%CO2培养。
请教各位,我到底是哪里有问题,是胰酶消化的时间长了吗?
请大神前辈指点指点,已经研三了,实验很不顺利,再这样都要延期的节奏了。请问最近急性分离出来的大鼠心肌细胞很不耐钙,做膜片钳封接不上可能是什么原因造成的?谢谢了!
生物工程的应用领域非常广泛,包括农业、工业、医学、药物学、能源、环保、冶金、化工原料等。它必将对人类社会的政治、经济、军事和生活等方面产生巨大的影响,为世界面临的资源、环境和人类健康等问题的解决提供美好的前景。展开
细胞株(cell strain) 是通过选择法或克隆形成法从原代培养细胞中获得具有特殊性质或标志物的细胞称为细胞株。一般认为,细胞株是用单细胞分离培养或通过筛选的方法,由单细胞增殖形成的细胞群。细胞株的特殊性质或标志必须在整个培养期间始终存在。
细胞系(cell line) 是原代细胞经首次传代成功后即为细胞系。泛指一般可能传代的细胞。其中能够连续传代的细胞叫做连续细胞系或无限细胞系,不能连续培养的称为有限细胞系。大多数二倍体细胞为有限细胞系。由原先存在于原代培养物中的细胞世系所组成。如果不能继续传代,或传代次数有限, 可称为有限细胞系(finite cell line), 如可以连续培养, 则称为连续细胞系(continuous cell line), 培养50代以上并无限培养下去。人类肿瘤细胞,在体外培养半年以上,生长稳定,并连续传代的即可称为连续性株或系。
2.关键还是生长因子等的浓度;
3.如果需要的话,需要明胶包被.
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