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产品概述：产品参数 外观：黄色固体。DiO 溶于无水乙醇、无水 DMSO 和无水DMF，在无水 DMSO 中的溶解度约为 10 mg/mL。较难溶解时，可以适当加热或者超声处理。 Ex/Em(MeOH) = 484/501 nm CAS 号：34215-57-1 分子式：C53H85ClN2O6 分子量：882储存条件 4℃ 避光保存，有效期见外包装。 产品介绍 DiO 即 DiOC18(3)，是最常用的细胞膜荧光探针之一，呈现绿色荧光。DiO 是一种亲脂性膜染料，进入细胞膜后可以侧向扩散逐渐染色整个细胞的细胞膜。DiO 在进入细胞膜之前荧光非常弱，当与细胞膜结合后其荧光强度大大增强，被激发后可以发出绿色荧光，具有很高的淬灭常数和激发态寿命，可以用标准的 FITC 滤光片检测。 DiO 作为示踪剂或长期示踪剂，被广泛用于正向或逆向的，活的或固定的神经等细胞或组织。DiO 通常不会显著影响细胞的生存力。DiO 除了细胞膜荧光标记外，还可用于检测细胞的融合和粘附，发育或移植过程中的细胞迁移，通过 FRAP（光脱色荧光恢复技术）检测脂在细胞膜上的扩散，检测细胞毒性和标记脂蛋白等。 DiO 染色后可进行多聚甲醛（不可使用甲醇等其他试剂）的固定，但不建议在染色后进行透化的过程。此外，在固定透化（室温下用 0.1% TritonX-100 透化）后，也可以很好地进行质膜染色。DiO 染色强度通常低于 DiI，有时在固定组织中会完全丧失。注意事项 1. DiO 染色固定的细胞或组织样品时，样品宜使用配制在PBS 中的 4%多聚甲醛进行固定，使用其它不适当的固定液会导致荧光背景较高。 2. 荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。 3. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
说明书：
UE-D4007
UE-D4007MSDS：MSDS D4007 DiO (Green fluorescence probe for cell membrane)
常见问题解答：◆用PBS稀释后的DiO工作液染色时出现聚沉现象，怎么处理？
因为这类细胞膜染料在水中的溶解性不好，建议用PBS稀释时稍微加入一点DMSO有机溶剂，来增加其溶解度◆固定后的细胞，可以用DiO进行染色吗？该类细胞膜染料可以染色固定后的细胞样本，但如果固定过程中，细胞膜破损，会影响染色的效果◆DiO也可以染色细胞内的细胞器膜吗？可以，因为DiO染色细胞膜是非特异性的，所以细胞器的膜也会被染上色，如果不想细胞器染色太明显，可以减少孵育时间或者将染料浓度降低◆细胞追踪有很多产品，该如何选择？首先确定追踪细胞的时间，然后考虑染料结合机制。1.钙黄绿素染料（C4041）标记均匀且对短期细胞迁移示踪效果极佳，但也会被某些类型细胞迅速外排。2.亲脂性的花青素染料，如DiI（D4010），DIO（D4007），DiA(D4059)，DiD(D4019)，DiR(D4006)能标记细胞膜而不破坏其功能，并且能持续更长时间，但如果发生膜融合则可能会染上其他细胞。此外，它们还会在透化过程中丢失。3.CellTracker染料（C4060）更有利于长期标记，其带有温和的氯甲基反应基团使之能够与细胞组分共价结合。4.CFDA SE（C4070）也能共价地结合于细胞组分。在所有列出的试剂中，细胞内保留与否取决于细胞分裂的速率和细胞的固有特性（主动外排，膜和蛋白质的周转率等）。其中共价结合试剂比非共价结合的试剂展现出更长的保留时间
使用本产品的文献：1.Overcoming the Reticuloendothelial System Barrier to Drug Delivery with a “Don’t-Eat-Us” StrategyYixuan Tang，Xiaoyou Wang，Jie Li，Yu Nie，Guojian Liao，Yang Yu，Chong LiACS NANO应用方向：细胞膜染色2.Inducing Endoplasmic Reticulum Stress to Expose Immunogens: A DNA Tetrahedron Nanoregulator for Enhanced ImmunotherapyYanhua Li，Xia Zhang，Xiuyan Wan，Xiaohan Liu，Wei Pan，Na Li，Bo TangAdv. Funct. Mater.参考文献1.Optimizing conditions and avoiding pitfalls for prolonged axonal tracing with carbocyanine dyes in fixed rat spinal cords应用方向：标记示踪2.Labeling with fluorescent carbocyanine dyes of cultured endothelial and smooth muscle cells by growth in dye-containing medium应用方向：细胞迁移3.A versatile flow cytometry-based assay for the determination of short- and long-term natural killer cell activity应用方向：细胞毒性4.Neurons secrete miR-132-containing exosomes to regulate brain vascular integrity应用方向：标记的神经细胞外泌体5.Microfluidic device (ExoChip) for On-Chip isolation, quantification and characterization of circulating exosomes.应用方向：用DiO进行外泌体染色，通过荧光的强弱对不同来源样品中的外泌体进行定量分析
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2018-12-26
方案11．细胞培养材料：取病人手术切下的病理性瘢痕组织及其周围正常组织。2.取材部位：前胸、四肢等，病人年龄从3到35岁，瘢痕生长时间为6个月到1.5年。3.采取组织块贴壁法进行成纤维细胞培养。4．过程：在手术室无菌条件下将手术切下的病理性瘢痕及周围正常组织小心去除表皮及皮下脂肪组织， 查看更多
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2017-11-13
湖南优诚生物有限公司在发布的原代细胞分离与培养供应信息，浏览与原代细胞分离与培养相关的产品或在搜索更多与原代细胞分离与培养相关的内容。 查看更多
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2018-01-24
北京爱尚阳光科技有限公司在发布的Smart 细胞培养瓶供应信息，浏览与Smart 细胞培养瓶相关的产品或在搜索更多与Smart 细胞培养瓶相关的内容。 查看更多
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2021-08-19
上海研生实业有限公司所提供的兔子胶原酶IELISA试剂盒质量可靠、规格齐全,上海研生实业有限公司不仅具有精湛的技术水平,更有良好的售后服务和优质的解决方案,欢迎您来电咨询此产品具体参数及价格等详细信息！ 查看更多
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2017-06-15
青岛高科技工业园海博生物技术有限公司在发布的PH6.8磷酸盐缓冲液供应信息，浏览与PH6.8磷酸盐缓冲液相关的产品或在搜索更多与PH6.8磷酸盐缓冲液相关的内容。 查看更多
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2018-07-15
Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D milliporeBD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTexBio-Rad DSHB tocrispeprotech 等品牌；部分产品现货，超低比价，另常备 Trizol DMSO lipo2000lipo3000 SC-2004 SC-2005常备现货 ；货期 查看更多
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2021-08-27
北京绿百草科技发展有限公司在发布的SDS-PAGE 6x样品缓冲液，含还原剂Sample Buffer Solution with Reducing Reagent(6x) for SDS‐PAGE供应信息，浏览与SDS-PAGE 6x样品缓冲液，含还原剂Sample Buffer Solution with Reducing Reagent(6x) for SDS‐PAGE相关的产品或在搜索更多与SDS-PAGE 6x样品缓冲液，含还原剂Sample Buffer Solution with 查看更多
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2019-04-01
北京裕恒丰科技有限公司在发布的#M1700小鼠雪旺细胞-ScienCell原代细胞供应信息，浏览与#M1700小鼠雪旺细胞-ScienCell原代细胞相关的产品或在搜索更多与#M1700小鼠雪旺细胞-ScienCell原代细胞相关的内容。 查看更多
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2020-01-06
北京裕恒丰科技有限公司在发布的成纤维细胞转染试剂盒供应信息，浏览与成纤维细胞转染试剂盒相关的产品或在搜索更多与成纤维细胞转染试剂盒相关的内容。 查看更多
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2019-03-08
原代细胞(primary cell)是指从机体的组织中经蛋白酶或其它的方法获得、并在体外进行培养的细胞，称为原代细胞。一般认为，培养的原代的第1代细胞和传代到第10代以内的细胞统称为原代细胞培养。 细胞系(cell strain)：原代培养物经首次传代成功后即为细胞系，由原先存在于原代培养物中的细胞世系所组成。如果不能继续传代，或传代次数有限，可称为有限细胞系，如可以连续培养，则称为连续细胞系，培养50代以上并无限培养下去。 细胞株(... 查看更多
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2018-05-23
北京嘉美纽诺生物科技有限公司在发布的细胞生物学：诱导多功能干细胞(iPS)技术实验服务供应信息，浏览与细胞生物学：诱导多功能干细胞(iPS)技术实验服务相关的产品或在搜索更多与细胞生物学：诱导多功能干细胞(iPS)技术实验服务相关的内容。 查看更多
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mRFPEGFPLC3稳转细胞株构建 肿瘤医学讨论版 专业医生社区...123
longmed2021-08-02
请教各位前辈:流式细胞分析技术检测细胞周期和细胞 123
yqin7192021-07-26
请教各位前辈：流式细胞分析技术检测细胞周期和细胞凋亡的变化，是不是一般都是用AnnexinV-PI试剂的？据说这个比较贵是吗？有其他的可以代替吗？
【求助】逆转录病毒载体不带GFP,如何进行构建稳转细胞株?谢谢 ...123
drjasionzl2012-12-11
传代细胞和原代细胞的克隆难易 123
轮回决濦2021-08-01
原代细胞，即原代培养的细胞，也就是培养不超过10次的细胞，是细胞培养的一个阶段传代细胞，即传代培养的细胞，也就是培养在10到50次之间的细胞，也是胞培养的一个阶段二倍体细胞就是细胞内含有两个染色体组的细胞，没什么作用，就是个二倍体。杂交瘤细胞是细胞融合的产物，用于制备单克隆抗体
TE缓冲液(pH 8.0)配制方法 123
风记社六团mfj2017-09-28
10 mmol/LTris-HCl(pH 8.0)
1 mmol/LEDTA(pH 8.0)
因为含有以上两种物质，所以称为TE。
配制分三步：
1)1 M Tris-HCl (pH 8.0) 50 ml的配制：称取Tris碱6.06 g，加超纯水40 ml溶解，滴加浓HCl约2.1 ml调pH至8.0，定容至50 ml。
2)0.5 M EDTA（pH 8.0）50 ml的配制：称取EDTA-Na2·2H2O 9.306 g，加超纯水35 ml，剧烈搅拌，用约1 g NaOH颗粒调pH至8.0，定容至50 ml。（EDTA二钠盐需加入NaOH将pH调至接近8.0时，才会溶解。）
3)1×TE（10 mM Tris-HCl，pH 8.0；1 mM EDTA，pH 8.0）的配制：
作用：
TE缓冲液是弱碱性,对DNA的碱基有保护性,(DNA在它是的稳定性较好,不易破坏其完整性或产生开环及断裂),包括提取好的DNA也要放在TE缓冲液是保存. 10mMTris-Hcl，pH有7.47.68.0三种。
EDTA调到8.0是为了更好溶解，其他只要调到相应pH就可以。Tris在7－8附近缓冲能力很强，所以加8.0的EDTA下去后，不会改变pH。
1 mmol/LEDTA(pH 8.0)
因为含有以上两种物质，所以称为TE。
配制分三步：
1)1 M Tris-HCl (pH 8.0) 50 ml的配制：称取Tris碱6.06 g，加超纯水40 ml溶解，滴加浓HCl约2.1 ml调pH至8.0，定容至50 ml。
2)0.5 M EDTA（pH 8.0）50 ml的配制：称取EDTA-Na2·2H2O 9.306 g，加超纯水35 ml，剧烈搅拌，用约1 g NaOH颗粒调pH至8.0，定容至50 ml。（EDTA二钠盐需加入NaOH将pH调至接近8.0时，才会溶解。）
3)1×TE（10 mM Tris-HCl，pH 8.0；1 mM EDTA，pH 8.0）的配制：
作用：
TE缓冲液是弱碱性,对DNA的碱基有保护性,(DNA在它是的稳定性较好,不易破坏其完整性或产生开环及断裂),包括提取好的DNA也要放在TE缓冲液是保存. 10mMTris-Hcl，pH有7.47.68.0三种。
EDTA调到8.0是为了更好溶解，其他只要调到相应pH就可以。Tris在7－8附近缓冲能力很强，所以加8.0的EDTA下去后，不会改变pH。
四种转染试剂对H9C2细胞转染效率的比较 道客巴巴123
银妈E07GG2021-07-21
首先你得明确这个h9c2细胞的培养是否好做，操作是否稳定。
然后你得确定，这个细胞株对于你得研究来说不可或缺，具有明确的代表性。
上面两个都没有问题的话，祝你顺利。
然后你得确定，这个细胞株对于你得研究来说不可或缺，具有明确的代表性。
上面两个都没有问题的话，祝你顺利。
【求助】求小鼠睾丸支持细胞分离经验_问答详情_细胞分离_细胞...123
hxy00222013-08-20
各位前辈，我现在要分离小鼠睾丸支持细胞进行培养，但是做了三次都没有贴壁，不知道问题出在哪，**指导！！！
我的步骤：
1、16－22天小鼠颈椎脱臼法处死后，75%酒精浸泡30秒消毒，睾丸取出后置预冷PBS，40分钟（路上所需时间）后开始处理。
2、剔除白膜，剪碎睾丸。0.25%胰酶（含edta）1.5ml/个睾丸37°C消化30-50分钟，等体积DMEM/F12含10%FBS终止消化，1000r/MIN离心5分钟，弃上液。
3、加0.1%胶原酶消化30分钟，过200目网筛，1000r/MIN离心5分钟，弃上液。
4、DMEM/F12含10%FBS5ml重悬后转如培养瓶，入孵育箱37°C5%CO2培养。
请教各位，我到底是哪里有问题，是胰酶消化的时间长了吗？
我的步骤：
1、16－22天小鼠颈椎脱臼法处死后，75%酒精浸泡30秒消毒，睾丸取出后置预冷PBS，40分钟（路上所需时间）后开始处理。
2、剔除白膜，剪碎睾丸。0.25%胰酶（含edta）1.5ml/个睾丸37°C消化30-50分钟，等体积DMEM/F12含10%FBS终止消化，1000r/MIN离心5分钟，弃上液。
3、加0.1%胶原酶消化30分钟，过200目网筛，1000r/MIN离心5分钟，弃上液。
4、DMEM/F12含10%FBS5ml重悬后转如培养瓶，入孵育箱37°C5%CO2培养。
请教各位，我到底是哪里有问题，是胰酶消化的时间长了吗？
新生大鼠心肌细胞的分离和培养123
心sky2016-08-31
请大神前辈指点指点，已经研三了，实验很不顺利，再这样都要延期的节奏了。请问最近急性分离出来的大鼠心肌细胞很不耐钙，做膜片钳封接不上可能是什么原因造成的？谢谢了！
仲元中学吧仲元哥哥的学生们的天地123
tb_qatest012017-10-02
所谓生物工程，一般认为是以生物学(特别是其中的微生物学、遗传学、生物化学和细胞学)的理论和技术为基础，结合化工、机械、电子计算机等现代工程技术，充分运用分子生物学的最新成就，自觉地操纵遗传物质，定向地改造生物或其功能，短期内创造出具有超 远缘性状的新物种，再通过合适的生物反应器对这类“工程菌”或“工程细胞株”进行大规模的培养，以生产大量有用代谢产物或发挥它们独特生理功能一门新兴技术生物工程包括五大工程，即遗传工程(基因工程)、细胞工程、微生物工程(发酵工程)、酶工程(生化工程)和生物反应器工程。在这五大领域中，前两者作用是将常规菌(或动植物细胞株)作为特定遗传物质受体，使它们获得外来基因，成为能表达超远缘性状的新物种——“工程菌”或“工程细胞株”。后三者的作用则是这一有巨大潜在价值的新物种创造良好的生长与繁殖条件，进行大规模的培养，以充分发挥其内在潜力，为人们提供巨大的经济效益 和社会效益。
生物工程的应用领域非常广泛，包括农业、工业、医学、药物学、能源、环保、冶金、化工原料等。它必将对人类社会的政治、经济、军事和生活等方面产生巨大的影响，为世界面临的资源、环境和人类健康等问题的解决提供美好的前景。展开
生物工程的应用领域非常广泛，包括农业、工业、医学、药物学、能源、环保、冶金、化工原料等。它必将对人类社会的政治、经济、军事和生活等方面产生巨大的影响，为世界面临的资源、环境和人类健康等问题的解决提供美好的前景。展开
整理)慢病毒稳转细胞株步骤.pdf原创力文档123
l小呆2021-07-28
原代细胞和传代细胞培养有哪些区别 123
御妹′d15002017-10-06
原代细胞(primary cell) 是指从机体的组织(如人组织、小鼠组织、大鼠组织和兔组织等)经蛋白酶或其它的方法获得单个细胞并在体外进行模拟机体培养的细胞，称为原代细胞。一般认为，培养的原代的第1代细胞和传代到第10代以内的细胞统称为原代细胞培养。在人工条件下使其原代细胞生存、生长、繁殖和传代，进行细胞生命过程、细胞癌变、细胞工程等问题的研究。
细胞株(cell strain) 是通过选择法或克隆形成法从原代培养细胞中获得具有特殊性质或标志物的细胞称为细胞株。一般认为，细胞株是用单细胞分离培养或通过筛选的方法，由单细胞增殖形成的细胞群。细胞株的特殊性质或标志必须在整个培养期间始终存在。
细胞系(cell line) 是原代细胞经首次传代成功后即为细胞系。泛指一般可能传代的细胞。其中能够连续传代的细胞叫做连续细胞系或无限细胞系，不能连续培养的称为有限细胞系。大多数二倍体细胞为有限细胞系。由原先存在于原代培养物中的细胞世系所组成。如果不能继续传代，或传代次数有限， 可称为有限细胞系(finite cell line)， 如可以连续培养， 则称为连续细胞系(continuous cell line)， 培养50代以上并无限培养下去。人类肿瘤细胞，在体外培养半年以上，生长稳定，并连续传代的即可称为连续性株或系。
细胞株(cell strain) 是通过选择法或克隆形成法从原代培养细胞中获得具有特殊性质或标志物的细胞称为细胞株。一般认为，细胞株是用单细胞分离培养或通过筛选的方法，由单细胞增殖形成的细胞群。细胞株的特殊性质或标志必须在整个培养期间始终存在。
细胞系(cell line) 是原代细胞经首次传代成功后即为细胞系。泛指一般可能传代的细胞。其中能够连续传代的细胞叫做连续细胞系或无限细胞系，不能连续培养的称为有限细胞系。大多数二倍体细胞为有限细胞系。由原先存在于原代培养物中的细胞世系所组成。如果不能继续传代，或传代次数有限， 可称为有限细胞系(finite cell line)， 如可以连续培养， 则称为连续细胞系(continuous cell line)， 培养50代以上并无限培养下去。人类肿瘤细胞，在体外培养半年以上，生长稳定，并连续传代的即可称为连续性株或系。
如何提高动物细胞原代细胞培养的成功率?_123
迷迭逆夏1bf2017-10-01
1.培养基最好是培养原代细胞专门的培养基或说是配套的培养基；
2.关键还是生长因子等的浓度；
3.如果需要的话,需要明胶包被.
2.关键还是生长因子等的浓度；
3.如果需要的话,需要明胶包被.
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