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蚂蚁淘/5(6)-CFDA, SE(5(6)-羧基荧光素二乙酸,琥珀酰亚胺酯)/5 mg/C4070
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蚂蚁淘/5(6)-CFDA, SE(5(6)-羧基荧光素二乙酸,琥珀酰亚胺酯)/5 mg/C4070
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mayitao
货号 / 
C4070
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产品概述:产品参数 外观:可溶于 DMSO 的白色或浅黄色固体 CAS 号:150347-59-4 Ex/Em:494/521 nm(pH=7) 分子式:C29H19NO11 分子量:557.47 储存条件 -20℃ 避光保存,有效期见外包装。 产品介绍 5(6)-CFDA, SE 是一种可对活细胞进行荧光标记的细胞示踪染料,不仅可用于细胞增殖的体外实验,还可用于追踪细胞在体内的分裂增殖过程。 5(6)-CFDA, SE 是二乙酸荧光素(Fluorescein diacetate,FDA)的衍生物,具有细胞膜渗透性,本身不具有荧光发光性。当通过被动运输穿透细胞膜进入活细胞后,被胞浆内的酯酶催化生成羧基荧光素琥珀酰亚胺酯(carboxyfluoresceinsuccinimidyl ester,CFSE),可发强烈的绿色荧光,不能穿透细胞膜,能完好的保留在胞内。CFSE 还可自发并不可逆地与细胞内的氨基结合从而偶联到细胞蛋白质上,同时过量且未被偶联的 5(6)-CFDA, SE通过被动扩散回到细胞外培养基内,被后续清洗步骤所清除。经 5(6)-CFDA, SE 标记的非分裂细胞的荧光非常稳定,稳定标记的时间可达数月,因此非常适用于细胞群落分析。 5(6)-CFDA, SE 标记细胞的荧光非常均一,优于以前使用的其他细胞示踪荧光探针如 PKH 26,并且分裂后的子代细胞的荧光分配也很均一。在细胞分裂增殖过程中,CFSE标记荧光可平均分配至两个子代细胞中,荧光强度变为亲代细胞的一半,通过流式细胞仪(FL1 通道)根据荧光强度的不同,可检测出未分裂细胞,分裂一次(1/2 的荧光强度),二次(1/4 的荧光强度),三次(1/8 的荧光强度),以及更多分裂次数的细胞。5(6)-CFDA, SE 可检测分裂次数多达八次甚至更多。经 5(6)-CFDA, SE 标记的细胞可用于体外和体内增殖研究 ,且具有不会使邻近细胞染色的功能 。5(6)-CFDA, SE 最常用于淋巴细胞的增殖检测,也可用于成纤维细胞,自然杀伤细胞,造血祖细胞等其他细胞的增殖检测。 5(6)-CFDA, SE 标记细胞呈绿色荧光,除了流式细胞仪检测细胞增殖外,还可用荧光酶标板定量活细胞数目,或者用荧光显微镜进行均一染色的细胞示踪观察。注意事项 1. 5(6)-CFDA, SE 与胺基反应,所以实验过程中不可使用含胺的缓冲液。 2. 荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。 3. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
说明书:UE-C4070
常见问题解答:◆细胞追踪有很多产品,该如何选择?首先确定追踪细胞的时间,然后考虑染料结合机制。1.钙黄绿素染料(C4041)标记均匀且对短期细胞迁移示踪效果极佳,但也会被某些类型细胞迅速外排。2.亲脂性的花青素染料,如DiI(D4010),DIO(D4007),DiA(D4059),DiD(D4019),DiR(D4006)能标记细胞膜而不破坏其功能,并且能持续更长时间,但如果发生膜融合则可能会染上其他细胞。此外,它们还会在透化过程中丢失。3.CellTracker染料(C4060)更有利于长期标记,其带有温和的氯甲基反应基团使之能够与细胞组分共价结合。4.CFDA SE(C4070)也能共价地结合于细胞组分。在所有列出的试剂中,细胞内保留与否取决于细胞分裂的速率和细胞的固有特性(主动外排,膜和蛋白质的周转率等)。其中共价结合试剂比非共价结合的试剂展现出更长的保留时间

◆CFDA SE能否用于干细胞的增殖检测?CFDA SE细胞增殖与示踪检测试剂盒可以用于各种常见细胞的增殖和示踪检测,包括干细胞、神经细胞等◆称量粉末的时候需要避光吗?建议避光的◆该产品是无菌的吗?是粉末,用DMSO配制母液,不需要做过滤除菌

使用本产品的文献:参考文献1.5,6-carboxyfluorescein diacetate succinimidyl ester-labeled apoptotic and necrotic as well as detergent-treated cells can be traced in composite cell samples.应用方向:除追踪活细胞外,还可以用来追踪复合样本中的死亡细胞2.Vascularized organoid engineered by modular assembly enables blood perfusion应用方向:标记HepG2细胞进行共培养3.Decreased proliferative capability of CD4(+) cells of elderly people is associated with faster loss of activation-related antigens and accumulation of regulatory T cells.应用方向:染色组织块上采集的静脉血中分离出的外周血单个核细胞(PBMC)4.Glioma stem cells promote radioresistance by preferential activation of the DNA damage response.应用方向:对原发性胶质母细胞瘤T3590进行标记5.Deletion of a coordinate regulator of type 2 cytokine expression in mice.

应用方向:标记CD4+T细胞

6.Fluorescent labeling of nano-sized vesicles released by cells and subseqUEnt quantitative and qualitative analysis by high-resolution flow cytometry.应用方向:使用CFSE进行标记的外泌体可以用于后续FACS、NTA和显微镜观察使用
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方案11.细胞培养材料:取病人手术切下的病理性瘢痕组织及其周围正常组织。2.取材部位:前胸、四肢等,病人年龄从3到35岁,瘢痕生长时间为6个月到1.5年。3.采取组织块贴壁法进行成纤维细胞培养。4.过程:在手术室无菌条件下将手术切下的病理性瘢痕及周围正常组织小心去除表皮及皮下脂肪组织, 查看更多>
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2021-08-27
北京绿百草科技发展有限公司在发布的SDS-PAGE 6x样品缓冲液,含还原剂Sample Buffer Solution with Reducing Reagent(6x) for SDS‐PAGE供应信息,浏览与SDS-PAGE 6x样品缓冲液,含还原剂Sample Buffer Solution with Reducing Reagent(6x) for SDS‐PAGE相关的产品或在搜索更多与SDS-PAGE 6x样品缓冲液,含还原剂Sample Buffer Solution with 查看更多>
2019-04-01
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原代细胞(primary cell)是指从机体的组织中经蛋白酶或其它的方法获得、并在体外进行培养的细胞,称为原代细胞。一般认为,培养的原代的第1代细胞和传代到第10代以内的细胞统称为原代细胞培养。 细胞系(cell strain):原代培养物经首次传代成功后即为细胞系,由原先存在于原代培养物中的细胞世系所组成。如果不能继续传代,或传代次数有限,可称为有限细胞系,如可以连续培养,则称为连续细胞系,培养50代以上并无限培养下去。 细胞株(... 查看更多>
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相关疾病:心力衰竭范可尼贫血心肌梗死癌症mRFP-EGFP-LC3稳转细胞株构建质粒来源:Addgene#21074(载体pEGFP...

请教各位前辈:流式细胞分析技术检测细胞周期和细胞凋亡的变化,是不是一般都是用AnnexinV-PI试剂的?据说这个比较贵是吗?有其他的可以代替吗?

刚刚到货的逆转录病毒载体,发现其中无GFP,请问大家用这种无荧光的载体包装病毒并转到细胞后,如何进行下一步的筛杀稳定转染细胞株的实验,只能通过其抗生素的抗性进行筛选,盲目挑选单克隆么?谢谢大家!
原代细胞,即原代培养的细胞,也就是培养不超过10次的细胞,是细胞培养的一个阶段传代细胞,即传代培养的细胞,也就是培养在10到50次之间的细胞,也是胞培养的一个阶段二倍体细胞就是细胞内含有两个染色体组的细胞,没什么作用,就是个二倍体。杂交瘤细胞是细胞融合的产物,用于制备单克隆抗体
TE缓冲液(pH 8.0)配制方法 123
风记社六团mfj2017-09-28
10 mmol/LTris-HCl(pH 8.0)
  1 mmol/LEDTA(pH 8.0)
  因为含有以上两种物质,所以称为TE。
  配制分三步:
  1)1 M Tris-HCl (pH 8.0) 50 ml的配制:称取Tris碱6.06 g,加超纯水40 ml溶解,滴加浓HCl约2.1 ml调pH至8.0,定容至50 ml。
  2)0.5 M EDTA(pH 8.0)50 ml的配制:称取EDTA-Na2·2H2O 9.306 g,加超纯水35 ml,剧烈搅拌,用约1 g NaOH颗粒调pH至8.0,定容至50 ml。(EDTA二钠盐需加入NaOH将pH调至接近8.0时,才会溶解。)
  3)1×TE(10 mM Tris-HCl,pH 8.0;1 mM EDTA,pH 8.0)的配制:
  作用:
  TE缓冲液是弱碱性,对DNA的碱基有保护性,(DNA在它是的稳定性较好,不易破坏其完整性或产生开环及断裂),包括提取好的DNA也要放在TE缓冲液是保存. 10mMTris-Hcl,pH有7.47.68.0三种。
  EDTA调到8.0是为了更好溶解,其他只要调到相应pH就可以。Tris在7-8附近缓冲能力很强,所以加8.0的EDTA下去后,不会改变pH。
首先你得明确这个h9c2细胞的培养是否好做,操作是否稳定。
然后你得确定,这个细胞株对于你得研究来说不可或缺,具有明确的代表性。
上面两个都没有问题的话,祝你顺利。
各位前辈,我现在要分离小鼠睾丸支持细胞进行培养,但是做了三次都没有贴壁,不知道问题出在哪,**指导!!!
我的步骤:
1、16-22天小鼠颈椎脱臼法处死后,75%酒精浸泡30秒消毒,睾丸取出后置预冷PBS,40分钟(路上所需时间)后开始处理。
2、剔除白膜,剪碎睾丸。0.25%胰酶(含edta)1.5ml/个睾丸37°C消化30-50分钟,等体积DMEM/F12含10%FBS终止消化,1000r/MIN离心5分钟,弃上液。
3、加0.1%胶原酶消化30分钟,过200目网筛,1000r/MIN离心5分钟,弃上液。
4、DMEM/F12含10%FBS5ml重悬后转如培养瓶,入孵育箱37°C5%CO2培养。
请教各位,我到底是哪里有问题,是胰酶消化的时间长了吗?

请大神前辈指点指点,已经研三了,实验很不顺利,再这样都要延期的节奏了。请问最近急性分离出来的大鼠心肌细胞很不耐钙,做膜片钳封接不上可能是什么原因造成的?谢谢了!

所谓生物工程,一般认为是以生物学(特别是其中的微生物学、遗传学、生物化学和细胞学)的理论和技术为基础,结合化工、机械、电子计算机等现代工程技术,充分运用分子生物学的最新成就,自觉地操纵遗传物质,定向地改造生物或其功能,短期内创造出具有超 远缘性状的新物种,再通过合适的生物反应器对这类“工程菌”或“工程细胞株”进行大规模的培养,以生产大量有用代谢产物或发挥它们独特生理功能一门新兴技术生物工程包括五大工程,即遗传工程(基因工程)、细胞工程、微生物工程(发酵工程)、酶工程(生化工程)和生物反应器工程。在这五大领域中,前两者作用是将常规菌(或动植物细胞株)作为特定遗传物质受体,使它们获得外来基因,成为能表达超远缘性状的新物种——“工程菌”或“工程细胞株”。后三者的作用则是这一有巨大潜在价值的新物种创造良好的生长与繁殖条件,进行大规模的培养,以充分发挥其内在潜力,为人们提供巨大的经济效益 和社会效益。
生物工程的应用领域非常广泛,包括农业、工业、医学、药物学、能源、环保、冶金、化工原料等。它必将对人类社会的政治、经济、军事和生活等方面产生巨大的影响,为世界面临的资源、环境和人类健康等问题的解决提供美好的前景。展开
1、请教各位老师,转染质粒DNA的HepG2及HUH7细胞,如何筛选稳转细胞株
2、有限稀释法有没有protocol?
原代细胞(primary cell) 是指从机体的组织(如人组织、小鼠组织、大鼠组织和兔组织等)经蛋白酶或其它的方法获得单个细胞并在体外进行模拟机体培养的细胞,称为原代细胞。一般认为,培养的原代的第1代细胞和传代到第10代以内的细胞统称为原代细胞培养。在人工条件下使其原代细胞生存、生长、繁殖和传代,进行细胞生命过程、细胞癌变、细胞工程等问题的研究。
细胞株(cell strain) 是通过选择法或克隆形成法从原代培养细胞中获得具有特殊性质或标志物的细胞称为细胞株。一般认为,细胞株是用单细胞分离培养或通过筛选的方法,由单细胞增殖形成的细胞群。细胞株的特殊性质或标志必须在整个培养期间始终存在。
细胞系(cell line) 是原代细胞经首次传代成功后即为细胞系。泛指一般可能传代的细胞。其中能够连续传代的细胞叫做连续细胞系或无限细胞系,不能连续培养的称为有限细胞系。大多数二倍体细胞为有限细胞系。由原先存在于原代培养物中的细胞世系所组成。如果不能继续传代,或传代次数有限, 可称为有限细胞系(finite cell line), 如可以连续培养, 则称为连续细胞系(continuous cell line), 培养50代以上并无限培养下去。人类肿瘤细胞,在体外培养半年以上,生长稳定,并连续传代的即可称为连续性株或系。
1.培养基最好是培养原代细胞专门的培养基或说是配套的培养基;
2.关键还是生长因子等的浓度;
3.如果需要的话,需要明胶包被.