EpCAM is frequently upregulated in carcinomas but is not expressed in cancers of non-epithelial origin. EpCAM expression is not limited to human colon carcinomas; in fact, EpCAM is expressed in a variety of human epithelial tissues, carcinomas, and progenitor and stem cells. [Wiki]
Titering of the recombinant EpCAM antibody may be required for optimal performance.
1. The prediluted format is supplied in a dropper bottle and is optimized for use in IHC. After epitope retrieval step (if required), drip mAb solution onto the tissue section and incubate at RT for 30 min.
A portion of amino acids 100-224 (extracellular domain) was used as the immunogen for the recombinant EpCAM antibody.
Store the recombinant EpCAM antibody at 2-8oC (with azide) or aliquot and store at -20oC or colder (without azide).
NSJBio为生命科学界提供经典,广泛使用的单克隆抗体和的,新推向市场的单克隆和多克隆抗体,以及重组单克隆和人类蛋白质微阵列验证抗体的来源研究领域包括癌症,肿瘤生物标志物,细胞凋亡,免疫学,细胞生物学,转录因子和表观遗传学。许多产品提供多种尺寸,以更好地适应研究人员的测试需求和预算限制。全面的产品数据表提供产品信息和测试数据图像,并由经验丰富的技术服务提供支持。并且所有产品100%保证按照产品数据表中的说明进行操作。
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作者:陈丹来源:中国科技网
今日视点
美国约翰·霍普金斯儿童中心、密西西比大学医学中心和麻省大学医学院的研究人员3月3日在第20届逆转录病毒和机会性感染大会上报告说,他们首次实现了对一名感染艾滋病病毒(HIV)婴儿的“功能性治愈”。这项成果将有助于为根治儿童艾滋病病毒感染铺平道路。
“功能性治愈”艾滋病婴儿
据物理学家组织网报道,这名婴儿的母亲是位艾滋病病毒感染者,在他出生30小时后,医生便对其实施了抗逆转录病毒联合治疗。一系列测试表明,婴儿血液中的病毒在逐步减少,在他出生29天之后,病毒降低到了无法检测的水平。治疗一直持续到该婴儿18个月大时停止。10个月后,多次对其进行标准的血液检测,均没有发现血液中存在艾滋病病毒。HIV特异性抗体这一标准的HIV感染临床指标的测试结果也始终为负。
研究人员说,这名婴儿现在被视为“功能性治愈”,也就是说,无需终身用药,其体内的HIV感染已被完全控制,且标准的临床测试无法检测到血液中的HIV复制。但“功能性治愈”患者体内仍有少量病毒,可通过超灵敏方法识别出来,而与之相对而言的“根本性治愈”,则是指患者体内病毒已完全清除。
研究人员认为,可能是由于及时采用了抗病毒治疗,制止了病毒宿主的形成,该婴儿才得以治愈。病毒宿主指的是一种休眠细胞,其在大多数艾滋病患者停止治疗后短短数周内会再度引发感染,极难对付。
及早治疗是关键目前,为防止高风险新生儿感染HIV病毒,通常会对其施以为时6周的预防性剂量的多种抗病毒药物联合治疗;而一旦确诊感染,则改用治疗性剂量。但研究人员说,此次的特殊病例可能会改变目前的做法,因为它凸显了在极早期采用抗逆转录病毒疗法的治疗潜力。
“立即对新生儿采取抗病毒疗法,防止病毒的藏身之地在第一时间形成,由此可以帮助婴儿清除病毒,实现(对感染的)长期控制,而无需终身接受治疗。”该报告的主要作者、约翰·霍普金斯儿童中心的病毒学家德博拉·佩尔绍德说。
专家表示,不需要治疗、具有天然抑制艾滋病病毒的能力是极为罕见的,只在不到0.5%的成人艾滋病毒感染者身上观察到,他们被称为“精英控制者”,其免疫系统能抑制病毒的复制,使病毒数量保持在临床检测不到的水平。HIV专家一直在寻求一种方法,希望将所有的艾滋病患者转化为“精英控制者”,而这项最新成果有望改变局面。
“大规模地完全根除病毒是我们的长期目标,但就目前而言,这仍是遥不可及的,而对高风险新生儿实施积极、及时、准确、有针对性的抗病毒疗法,可能是我们实现功能性治愈的最佳机会。”麻省大学医学院免疫学家凯瑟琳·卢苏里亚加说。
研究人员同时提醒,他们还缺乏足够的数据,尚不能建议改变目前的做法,用治疗性剂量取代预防性剂量对高风险新生儿实施治疗,不过,这名“功能性治愈”婴儿的例子为开展原理验证研究提供了理论基础。
佩尔绍德说:“下一步是要证实,这究竟是对极早期抗逆转录病毒治疗的一个极不寻常的反应,还是一种同样可适用于其他高风险新生儿的方法。”
各种不同类别的免疫球蛋白分子都含有四条多肽链组成的基本结构单位,即由两条重链(heavy chain, H链)和两条轻链(light chain, L链)通过不同数目的二硫键结成Y形。在抗体分子的N端,不同抗体分子的氨基酸组成和顺序都是不同的,此区为“多变区“(variable region, V区),它是抗体分子与抗原决定簇的结合部位。由于抗体多变区这一结构特点,决定了它对抗原分子“识别功能”的多样性;不同抗体分子的C端结构基本恒定,称为“稳定区”(constant region, C区)。当抗原与抗体结合时,抗体分子发生变构效应和集聚作用,使稳定区的某些部位暴露出来,并立即发生一系列免疫生理效应,如固定补体,促进对抗原分子的吞噬、溶解和清除作用。
(一)特异性结合抗原
Ig最显著的生物学特点是能够特异性地与相应的抗原结合,如细菌、病毒、寄生虫、某些药物或侵入机体的其他异物。Ig的这种特异性结合抗原特性是由其V区(尤其是V区中的高变区)的空间构成所决定的。Ig的抗原结合点由L链和H链超变区组成,与相应抗原上的表位互补,借助静电力、氢键以及范德华力等次级键相结合,这种结合是可逆的,并受到pH、温度和电解浓度的影响。在某些情况下,由于不同抗原分子上有相同的抗原决定簇,或有相似的抗原决定簇,一种抗体可与两种以上的抗原发生反应,此称为交叉反应(cross reaction)。
抗体分子可有单体、双体和五聚体,因此结合抗原决定簇的数目(结合价)也不相同。Fab段为单价,不能产生凝集反应和沉淀反应。F(ab')2和单体Ig(如IgG、IgD、IgE)为双价。双体分泌型IgA有4价。五聚体IgM理论上应为10价,但实际上由于立体构型的空间位阻,一般只有5个结合点可结合抗原。 B细胞表面Ig(SmIg)是特异性识别抗原的受体,成熟B细胞主要表达SmIgM和SmIgD,同一B细胞克隆表达不同类SmIg其识别抗原的特异性是相同的。
(二)活化补体
1.IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通过经典途径活化补体。当抗体与相应抗原结合后,IgG的CH2和IgM的CH3暴露出结合C lq的补体结合点,开始活化补体。由于Clq6个亚单位中一般需要2个C端的球与补体结合点结合后才能依次活化Clr和Cls,因此IgG活化补体需要一定的浓度,以保证两个相邻的IgG单体同时与1个Clq分子的两个亚单位结合。当Clq一个C端球部结合IgG时亲和力则很低,Kd为10-4M,当Clq两个或两个以上球部结合两个或多个IgG分时,亲合力增高Kd为10-8M。IgG与Clq结合点位于CH2功能区中最后一个β折叠股318~322位氨基酸残基(Glu-x-Lys-x-Lys)。IgM倍以上。人类天然的抗A和抗B血型抗体为IgM,血型不符合引韦的输血反应发生快而且严重。
2.凝聚的IgA、IgG4和IgE等可通过替代途径活化补体。
(三)结合Fc受体
不同细胞表面具有不同Ig的Fc受体,分别用FcγR、FcεR、FcαR等来表示。当Ig与相应抗原结合后,由于构型的改变,其Fc段可与具有相应受体的细胞结合。IgE抗体由于其Fc段结构特点,可在游离情况下与有相应受体的细胞(如嗜碱性粒细胞、肥大细胞)结合,称为亲细胞抗体(cytophilic antibody)。抗体与Fc受体结合可发挥不同的生物学作用。1.介导I型变态反应变应原刺激机体产生的IgE可与嗜碱性粒细胞、肥大细胞表面IgE高亲力受体细胞脱颗粒,释放组胺,合成由细胞FcεRI结合。当相同的变应原再次进入机体时,可与已固定在细胞膜上的IgE结合,刺激细胞脱颗粒,释放组受,合成由细胞脂质来源的介质如白三烯、前列腺素、血小板活化因子等,引起Ⅰ型变态反应。
2.调理吞噬作用 调理作用(opsonization)是指抗体、补体C3b、C4b等调理素(opsonin)促进吞噬细菌等颗粒性抗原。由于补体对热不稳定,因此又称为热不稳定调理素(heat-labile opsonin)。抗体又称热稳定调理素(heat-stable opsonin)。补体与抗体同时发挥调理吞噬作用,称为联合调理作用。中性粒细胞、单核细胞和巨噬细胞具有高亲和力或低亲和力的FcγRI(CD64)和FcγRⅡ(CD32),IgG尤其是人IgG1和IgG3亚类对于调理吞噬起主要作用。嗜酸性粒细胞具有亲和力FcγRⅡ,IgE与相应抗原结合后可促进嗜酸性粒细胞的吞噬作用。抗体的调理机制一般认为是:①抗体在抗原颗粒和吞噬细胞之间“搭桥”,从而加强了吞噬细胞的吞噬作用;②抗体与相应颗粒性抗原结合后,改变抗原表面电荷,降低吞噬细胞与抗原之间的静电斥力;③抗体可中和某些细菌表面的抗吞噬物质如肺炎双球菌的荚膜,使吞噬细胞易于吞噬;④吞噬细胞FcR结合抗原抗体复合物,吞噬细胞可被活化。 抗体的调理吞噬作用。
3.发挥抗体依赖的细胞介导的细胞毒作用 当IgG抗体与带有相应抗原的靶细胞结合后,可与有FcγR的中性粒细胞、单核细胞、巨噬细胞、NK细胞等效应细胞结合,发挥抗体依赖的细胞介导的细胞毒作(antibodydependent cellmediated cytotoxicity,ADCC)。目前已知。NK细胞发挥ADCC效应主要是通过其膜表面低亲和力FcγRⅢ(CD16)所介导的,IgG不仅起到连接靶细胞和效应细胞的作用,同时还刺激NK细胞合成和分泌肿瘤坏死因子和γ干扰素等细胞因子,并释放颗粒,溶解靶细胞。嗜酸性粒细胞发挥ADCC作用是通过其FcεRⅡ和FcαR介导的,嗜酸性粒细胞可脱颗粒释放碱性蛋白等,在杀伤寄生虫如蠕虫中发挥重要作用。 抗体依赖的细胞介导的细胞毒作用(ADCC)。
此外,人IgGFc段能非特异地与葡萄菌A蛋白(staphylococcus proteinA,SPA)结合,应用SPA可纯化IgG等抗体,或代替第二抗体用。展开
其主要作用就是人体的防御军队,抵抗外来的病毒、细菌的侵袭。