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限制性内切酶疑难解决指南 | Thermo Fisher Scientific CN
来自 : mayitao

稀释限制性内切酶时,建议使用稀释缓冲液(A,B,C)。建议临用前稀释且稀释终浓度不要小于1,000units/ml。目录及说明书中标注了每一种内切酶相应的稀释兼容性。

注:以下稀释液不适用于耐热DNA聚合酶。欲了解稀释耐热DNA聚合酶的相关情况,请参见相应章节。

稀释缓冲液成份:

稀释液A:50mMKCl,10mMTris-HCl,0.1mMEDTA,1mMDTT,200µg/mlBSA和50%甘油(pH7.4@25°C)。

稀释液B:300mMNaCl,10mMTris-HCl,0.1mMEDTA,1mMDTT,500µg/mlBSA和50%甘油(pH7.4@25°C)。

稀释液C:250mMNaCl,10mMTris-HCl,0.1mMEDTA,1mMDTT,0.15%TritonX-100,200µg/mlBSA和50%甘油(pH7.4@25°C)。

*表示稀释时需要添加MgCl2至终浓度10mM

可用稀释缓冲液A进行稀释的酶:

AATIIAccIAcc65IAciIAfeIAflIIAhdIAlwIAlwNIApaIApaLIApoIAscIAvaIAvaIIBaeIBamHIBanIBanIIBbvIBbvCIBccIBceAIBcgIBciVIBclIBfrBIBfuAIBfuCIBglIIBlpIBme1580IBmtIBpu10IBpuEIBsaAIBsaBIBsaHIBsaJI

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可用稀释缓冲液B进行稀释的酶:

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可用稀释缓冲液C进行稀释的酶:

AgeIBmgBIBsrFIEcoRIFspINheINotIPstIRsrIISapISfiISspITfiI

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