NEB内切酶NEB连接酶NEB聚合酶M2200VQuickLigationKit15rxns产品概述:
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:qiaoxing2013
上海桥星-产品仅供科研,请勿挪作他用。
所有产品都有正品保障,透析袋现货,为美国Spectrumlabs、Viskase、cellu.sep三大公司生产。
快速连接试剂盒货号规格价格库存#M2200L150次反应4,569.00元有#M2200S30次反应1,009.00元有#M2200V15次反应509.00元有
快速末端平齐化和快速连接试剂盒
#E0542S20次反应?1,769
#E0542L100次反应?7,059
■5分钟快速连接粘性末端或平末端
■室温下即可进行连接反应
■T/A克隆
■dsDNA切刻修复
本试剂盒在室温(25℃)反应5分钟,即可完成DNA粘性末端或平齐末端的连接反应。
试剂盒组成份2X快速连接反应缓冲液132mMTris-HCl,20mMMgCl2,2mMDTT,2mMATP,15%聚乙二醇(PEG6000),pH7.6@
25℃。
该试剂盒经过严格的质量控制检测,以确保酶的高纯度和高效率。
注意事项用快速连接试剂盒能使大多数连接反应在25℃条件下5分钟甚至更短时间内达到反应终点,增加反应时间反应效率不会增强。事实上,连接1小时后转化效率便会降低,如果25℃反应过通宵,则转化效率会下降到75%。
电转化可以使转化效率提高几个数量级。在用快速连接反应产物做电转化前,一定要降低PEG浓度。推荐使用柱离心式DNA纯化方法,或选择电转连接酶(NEB#M0369)。
快速连接进程曲线:LITMUS28i载体经EcoRV切割(平齐末端)或HindⅢ切割(粘性末端)后,用小牛肠碱性磷酸酶(CIP)处理,胶回收纯化。插入片段来自φX174DNA的HaeⅢ消化产物(平齐末端)或λDNA的HindⅢ消化产物(粘性末端),插入片段和载体以3:1的比例,使用快速连接试剂盒进行连接。连接产物转化入化学方法制备的大肠杆菌感受态细胞,在LB-amp平板上37℃过通宵培养。