为什么双酶切有目的片段测序却没有
2021-08-01
问题描述：
利用NheI和HindIII双酶切插入目的片段，为什么双酶切有目的片段和切开的质粒，测序却没有？
并且测序后在NheI位点后的序列变成了-GGCTAGGTAC-Kpn位点（CGTTTAAACTTAAGCTTG消失。之前和之后的序列都相符），之间的怎么都没了？
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mpark
用户
Some of nucleotides in the sequence track CGTTTAAACT TAAGCTTG couldbe disappeared, but AGCTT should be remained in the clone, or how didyou cut off the insert, excepted that there is another Hind III sitein the insert. You need to upload your gel pictures with those enzyme digestions.
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momo602201879
用户左面的4个是酶切后的“重组质粒”，质粒大小3000左右，目的片段大概1670左右，最左面是2000的dnaMarker
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帆帆0816
用户我觉得是因为有些片段出现质粒断裂导致的结果你可以多挑几个去测序试试
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momo602201879
用户帆帆0816：送了几次测序了，都是这个结果，丢失了这部分碱基，是质粒断裂导致的吗
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mpark
用户DoyouhaveDNAsequencingresultsthatshowsequencesfrombottomstrand?
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mpark
用户Couldyoulabelthegelpicture?Doyouhaveanysingleenzymedigestiongelpicture?
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