载体构建,菌落PCR酶切鉴定都正确,测序无目的片段
2021-07-25
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293bbs
用户
我用了很多年的病毒载体,各种病毒也包过非常多,欢迎大家来我的病毒包装与质粒转染精华答疑贴答疑贴子链接:腺相关病毒包装(AAV)、慢病毒包装、腺病毒包装、细胞转染、病毒在体转染【技术答疑】
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ULYSSEESWB
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如果你确认酶切没问题,换家测序公司测序
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zxyapple
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应该是小片段污染,插入进去的都是很短的序列
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makira
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把转化后的全部质粒全都送去测序(先不验证)。因为测序结果是最有说服力的。筛选测序返回的结果,最后对序列正确的质粒做PCR及酶切验证。
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随风-逝
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实在不行你就用同工酶进行无缝连接吧,这样省事还省钱,成本差不多
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wanye831
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重新做一遍。或者外包
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易醉段子熊
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楼主发现是什么原因了吗?我现在构载体,情况和你的一样,很苦恼,求告知原因
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