- Product NamePKC zeta (Phospho-Thr410) Colorimetric Cell-Based ELISA Kit
- Catalog NoCBP1022
- Detection MethodColorimetric 450 nm
- Dynamic Range> 5000 Cells
- Storage/Stability4°C/6 Months
- ReactivityHuman, Mouse, Rat
- Assay TypeCell-Based
- Database LinksGene ID: 5590, UniProt ID: Q05513, OMIM #: 176982, Unigene #: Hs.496255
- Format2 x 96-Well Microplates
- Manual (PDF)Download
- NCBI Gene SymbolPRKCZ
- Sub TypePhospho
- SynonymsKPCZ, PKC-zeta, PKC2, PRKCZ, Protein kinase C zeta type, kinase PKC-zeta, nPKC-zeta
- TargetNamePKC zeta (Phospho-Thr410)
AssayBiotechnology公司成立于2006年,位于美国洛杉矶。AssayBiotechnology公司有超过六千种抗体,涵盖了各种研究和应用领域。另外,AssayBiotechnology公司还拥有一千多种磷酸化抗体,同时公司正努力生产所有人类genowide抗体,针对到2015年为止出版过的调控磷酸化位点的抗体。作为可靠的高质量抗体生产商,AssayBiotechnology公司拥有多年研发经验的高级科学家确保了公司抗体的高品质,高特异性,100%的保证抗体质量。
AssayBiotechnology公司利用主要由混合抗原均一化技术和人类cDNA/EST噬菌体表面呈现文库技术两项具有自主知识产权的专有技术组成抗人类蛋白单克隆抗体大规模开发生产平台,完美地解决了传统的单克隆抗体生产耗时过长及成本过高的瓶颈。AssayBiotechnology公司可在较短的时间内将剩余的抗人类基因编码蛋白质单克隆抗体开发完,从而建立世界上第一个与人类基因库相配套的抗人类蛋白单克隆抗体库和抗原库(该抗体库和抗原库与国际上通用的GenBank相链接),并建成全球种类最多和规模最大的抗人类蛋白单克隆抗体生产体系和销售中心。
与人类基因相联系的抗体蛋白与抗原蛋白信息是有限的,并且每一个抗体与抗原蛋白相关信息都是唯一的和不可复制的,和人类基因组计划一样,谁先开发出来谁就拥有垄断优势。AssayBiotechnology公司开发出抗体库和抗原库之后,将对每一个新发现的和有价值的抗体与抗原信息申请专利保护,以后所有应用到这些抗体与抗原信息的需求者(例如药物靶点筛选)都必须向AssayBiotechnology公司购买使用许可,因而这是最新生命科学领域的战略高地。
自2006年1月成立以来,AssayBiotechnology一直是行业*的抗体生产和工程及分析技术,荧光染料,淬灭剂,重组蛋白和合成肽的全球贡献者。我们位于加利福尼亚州旧金山湾区的中心地带,致力于满足全球对医疗和学术研究中使用的高质量检测试剂盒和免疫试剂的需求,这些试剂主要构成医疗保健的基础。详细产品列表:AssayBiotech全国代理 货号产品规格OK-01004-1BB-R(Human)OmniKine™ELISAKit12x8-WellMicrostripsOK-0101BD-1(Human)OmniKine™ELISAKit12x8-WellMicrostripsOK-0102BD-2(Human)OmniKine™ELISAKit12x8-WellMicrostripsOK-0103BD-3(Human)OmniKine™ELISAKit12x8-WellMicrostripsOK-0104BD-4(Human)OmniKine™ELISAKit12x8-WellMicrostripsOK-0105Betacellulin(Human)OmniKine™ELISAKit12x8-WellMicrostripsOK-0106beta-NGF(Human)OmniKine™ELISAKit12x8-WellMicrostripsOK-0107BMP-2(Human)OmniKine™ELISAKit12x8-WellMicrostripsOK-0108CNTF(Human)OmniKine™ELISAKit12x8-WellMicrostripsOK-0109CTGF(Human)OmniKine™ELISAKit12x8-WellMicrostripsOK-0110CXCL-16(Human)OmniKine™ELISAKit12x8-WellMicrostripsOK-0111EGF(Human)OmniKine™ELISAKit12x8-WellMicrostripsOK-0112EG-VEGF(Human)OmniKine™ELISAKit12x8-WellMicrostripsOK-0113Eotaxin(Human)OmniKine™ELISAKit12x8-WellMicrostripsOK-0114Eotaxin-3(Human)OmniKine™ELISAKit12x8-WellMicrostripsOK-0115FGF-Basic(Human)OmniKine™ELISAKit12x8-WellMicrostripsOK-0116Follistatin(Human)OmniKine™ELISAKit12x8-WellMicrostripsOK-0117G-CSF(Human)OmniKine™ELISAKit12x8-WellMicrostripsOK-0118GM-CSF(Human)OmniKine™ELISAKit12x8-WellMicrostripsOK-0119GRO/MGSA(Human)OmniKine™ELISAKit12x8-WellMicrostripsA000114-3-3zeta(Phospho-Ser58)Antibody50ulA0002ADD1(Phospho-Ser726)Antibody50ulA0003AMPKalpha1/2(Phospho-Thr183/172)Antibody50ulA0004AmyloidbetaA4(Phospho-Thr743/668)Antibody50ulA0005CaMK2alpha/beta/delta(Phospho-Thr305)Antibody50ulA0006CREB(Phospho-Ser142)Antibody50ulA0007DARPP-32(Phospho-Thr75)Antibody50ulA0008EGFR(Phospho-Thr678)Antibody50ulA0009EGFR(Phospho-Thr693)Antibody50ulA0010EFNB1/2(Phospho-Tyr330)Antibody50ulA0011GABA-RB(Phospho-Ser434)Antibody50ulA0012GSK3alpha/beta(Phospho-Tyr279/216)Antibody50ulA0013HSP90B(Phospho-Ser254)Antibody50ulA0014IkappaB-beta(Phospho-Ser23)Antibody50ulA0015IkappaB-epsilon(Phospho-Ser22)Antibody50ulA0016Keratin18(Phospho-Ser33)Antibody50ulA0017Keratin8(Phospho-Ser73)Antibody50ulA0018MAPKAPK2(Phospho-Thr334)Antibody50ulA0019MEF2A(Phospho-Ser408)Antibody50ulA0020Myc(Phospho-Ser62)Antibody50ul
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石蜡切片组织茜素红钙染色试剂盒产品说明书(中文版)
主要用途
石蜡切片组织茜素红(ALIZARINREDS)钙染色试剂是一种旨在使用标准化的化学分离石蜡方法和鳌和技术,使钙离子和茜素红S产生复合物,来分析存档中的石蜡包埋的组织切片中橘红色钙沉积现象的权威而经典的技术方法。该技术经过精心改良、成功实验证明的。主要适用于石蜡包埋组织切片的钙沉积和钙化结节检测。广泛用于骨细胞或组织病理生理的研究。产品严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定,显色清晰。
技术背景
茜素红(ALIZARINREDS)是一种蒽醌(anthraquinone)衍生物:9,10-二氢-3,4-二羟基-9,10-二氧代-2-蒽磺酸单钠盐(9,10-Dihydro-3,4-dihydroxy-9,10-dioxo-2-anthracenesulfonicacidsodiumsalt),又称媒介红3(MordantRed3)或茜素磺酸钠(Sodiumalizarinesulfonate)。其分子式为C14H7NaO7S,分子量为342.25。茜素红和钙离子以鳌和方式形成复合物,用以识别组织细胞的钙盐成分。钙盐变化是骨细胞增殖分化和骨组织成骨潜能的标志之一。通过茜素红染色,产生桔红色沉积,但会受到其它金属元素的干扰。
产品内容
脱蜡液(ReagentA)自备
补水液A(ReagentB)100毫升
补水液B(ReagentC)100毫升
补水液C(ReagentD)100毫升
补水液D(ReagentE)100毫升
清理液(ReagentF)30毫升
染色液(ReagentG)10毫升
产品说明书1份
保存方式
保存在4℃冰箱里;染色液(ReagentG),避免光照;试剂具有腐蚀性,注意操作安全。有效保证3月
用户自备
小型染色缸:用于石蜡切片的脱蜡操作
光学显微镜:用于组织细胞染色后观察分析
实验步骤
一、脱蜡处理
1.取出10片待测的石蜡包埋的组织切片(注意:石蜡包埋前,组织切片须用10%甲醛4℃条件下,固定16小时,此步很重要)
2.(选择步骤)放进80℃烘箱,孵育30分钟
3.(选择步骤)室温下静置15分钟
4.按下表依次放进小染色缸里孵育
染色缸
孵育时间
50毫升脱蜡液(ReagentA)
15分钟
50毫升脱蜡液(ReagentA)
15分钟
50毫升脱蜡液(ReagentA)
15分钟
50毫升补水液A(ReagentB)
3分钟
50毫升补水液B(ReagentC)
3分钟
50毫升补水液C(ReagentD)
3分钟
50毫升补水液D(ReagentE)
3分钟
5.小心移去切片上的补水液D(ReagentE)
6.小心加上200微升清理液(ReagentF)在切片上,铺满整个切片样品表面
7.室温下孵育5分钟
8.小心移去切片上的清理液(ReagentF)
二、样本染色处理
1.小心加上200微升染色液(ReagentG),铺满整个切片样品表面
2.室温下孵育2分钟(注意:可以延长至20分钟);或直至可见桔红色
3.小心移去切片上的染色液(ReagentG)
4.空气中晾干
三、样本澄清处理
1.小心加上200微升补水液B(ReagentC)在切片上,铺满整个切片样品表面
2.小心移去切片上的补水液B(ReagentC)
3.重复实验步骤1和2二次
4.小心加上200微升补水液A(ReagentB)在切片上,铺满整个切片样品表面
5.小心移去切片上的补水液A(ReagentB)
6.重复实验步骤4和5二次
7.小心加上200微升脱蜡液(ReagentA)在切片上,铺满整个切片样品表面
8.小心移去切片上的脱蜡液(ReagentA)
9.重复实验步骤7和8一次
10.放上盖玻片或封片
11.即刻在一般光学显微镜下观察:钙沉积阳性细胞呈现桔红色
注意事项
1.本产品为50次操作
2.操作时,须带手套
3.试剂具有腐蚀性,注意操作安全
4.石蜡包埋前,组织样品须用10%甲醛4℃条件下,固定16小时,否则造成样品支离破碎
5.所有操作在室温下进行
6.试剂溶液在样品表面时,避免有气泡存在,同时确保铺满样品表面
7.样品染色避免过度,肉眼可见桔红色即可终止染色
8.组织细胞染色完成后,即刻进行光学显微镜观察
9.本公司提供系列组织细胞金属元素染色试剂产品
质量标准
1.本产品经鉴定性能稳定
2.本产品经鉴定显色清晰
1)做免疫组化的片子最好不要同时做HE染色,因为那样会掩盖阳性着色的结果;而且用苏木素复染细胞核也是淡染,若要在免疫组化的片子上观察形态学的改变,除非有非常典型的表现,一般是有很大的难度的。
2)你是培养的细胞做免疫组化吗?如果是的话,那就每个样本只有一张片子吧?唯一的办法是进行免疫双染,同时做CD34和AFP(甲胎蛋白)。我觉得后者阳性便可以或多或少的获得向肝细胞分化的证据。
3)用HE染色来识别造血干细胞向肝细胞分化,也就是说要看到肝细胞的典型形态学改变后才可以下结论。问题是:早期的肝细胞仅凭形细胞态学观察并不能很容易的被识别。病理大夫看组织切片,重要的是看其组织学结构,对肝细胞也是这样。如果单拿出来一个细胞,还是培养的细胞,染色后真的不容易区分。所以我觉得你设计的用HE染色来确定早期细胞向哪个方向分化不是很有说服力。
4)如果是切片,也就是说每个样本可以有多张切片,那可以在连续切片上分别染CD34和AFP,拍照时选择相同视野,也有一定说服力。但是还是不如双染法更可靠。
5)用双染最大的问题在于:这两者都表达在胞浆中,染色容易相互覆盖。所以在双染的方法选择上你还要再考虑一下,可不可以用免疫荧光双染?这样也很有说服力的
本人对软骨石蜡切片做了MMP-13的免疫组化染色,首次做,无法判断染色部位,请各位帮忙看一下
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