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抗体蛋白质纯化的好方法
2018-01-23
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rosarabbit
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抗体纯化分了几种类型,根据用途决定选择哪种方法进行纯化:1. 粗纯:将制备抗体的血清或是腹水,细胞上清,直接用盐析法进行处理,这样可以将这些物质里面的其他杂质去掉,获得蛋白的成分,但是由于是粗纯,里面会混有大量的其他蛋白,这样获得的抗体,纯度较低,用于实验中背景比较高。2.通用型纯化:用抗体结合蛋白Protein A,Protein G或者Protein L。因为不同来源的抗体和这些抗体结合蛋白的结合能力不同,所以需要根据抗体来源选择使用哪种抗体将诶和蛋白最好。对于有一些单链抗体,则多半使用protein L来进行纯化。经过抗体结合蛋白的亲和纯化后,溶液中基本只保留了抗体的成分,其他蛋白都去掉了,抗体纯度可以比较高。相对来说,这种方法是大规模抗体制备中,用得最多的纯化方法,很多抗体公司都采用这种方法来对抗体进行纯化。3.特异型纯化:但是有些抗体,需要纯度特别高,特异性特别好,就不能简单采用上述两种方法进行纯化了。必须要通过将抗原固定制备成特异的亲和纯化柱,再纯化抗体。这个时候得到的就全是针对一种抗原的抗体了,特异性最好。当然,由于牵涉到抗原固定等操作,成本相应是最高的。
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13415979009
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目前抗体纯化分3个步骤1、捕获:通常用ProteinA或G,成本比较高,目前PALL公司有一款MEP的填料,可以替换ProteinA或G,价格只有ProteinA的八分之一,国内已经有抗体公司在使用这款填料做生产,特别推荐。2、离子交换:各个牌子性能都差不多3、去除多聚体等:GE、Bio-Rad的CHT、PALL的混合模式填料都可以,我有这几个牌子填料去除多聚体的报告,有需要写邮件给我,89347157@qq.com
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707dna
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带有抗原的柱子
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xhjggl
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可以使用上海生工的SF024-NHS与抗原绞链后,纯化抗体
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