Human CD21 is a receptor for complement fragments C3d, C3dg or ic3D (1, 5) and also EBV (4). CD21 is also a ligand for CD23 and plays a role in IgE synthesis (3).
Isotype: Murine IgG1
Immunogen: Human HFB-1 cell line
Specificity: Antibody BU33 recognizes the CD21 molecule of about 145 kd (1). BU33 has been shown to bind to Equine B cells, suggesting cross reactivity (7).
Functional Application: Antibody BU33 inhibits the CD21 - CD23 interaction (2, 6, 8).
References:
1. Leukocyte Typing V (S.F. Schlossman, et al, eds.) Oxford University Press, Oxford, (1995) p. 516-523.
2. Leukocyte Typing V (S.F. Schlossman, et al, eds.) Oxford University Press, Oxford, (1995) p. 535-538.
3. J.Y. Bonnefoy, et al, (1995) Intl Archiv Allergy Immunol 107: 40-42.
4. A.D. Beaulieu, et al, (1995) Blood 86: 2789-2798.
5. H. Molina, et al, (1995) J Immunol 154: 5426-5435.
6. S Henchoz, J Y Bonnefoy, et al. (1994) Immunology 81(2): 285-290.
7. S. Mayall, Hamblin A.S., et al. (2001) J Comp Pathol 124(1): 83-87.
8. S Henchoz, J Y Bonnefoy, et al. (1996) Immunolgy 88: 35-39.
ebiomall.com
>
>
>
>
>
>
>
>
>
>
>
>
没有序列识别的功能,他就是简单的催化相邻DNA链的5-P末端和3'-OH末端以磷酸二酯键结合的反应,需ATP作辅酶。 不仅可以催化粘性末端之间或平滑末端之间的DNA的连接,也催化DNA与RNA之间以及少数RNA之间的连接。
反转录酶(Reversetranscripatase)是以RNA为模板指导三磷酸脱氧核苷酸合成互补DNA(cDNA)的酶。哺乳类C型病毒的反转录酶和鼠类B型病毒的反转录酶都是一条多肽链。鸟类RNA病毒的反转录酶则由两上亚基结构。真核生物中也都分离出具有不同结构的反转录酶。
在进行RT反应之前,应考虑以下几个方面:
1、RNA
成功的cDNA合成来自高质量的RNA,高质量的RNA至少应保证全长并且不含逆转录酶的抑制剂,如EDTA或SDS。在提取RNA的过程中,要特别防止RNase的污染,同时在逆转录反应中经常加入RNase抑制剂以增加cDNA合成的长度和产量。RNase抑制剂要在第一链cDNA合成反应中,在缓冲液和还原剂(如DTT)存在的条件下加入,因为cDNA合成前的过程会使抑制剂变性,从而释放结合的可以降解RNA的RNase。蛋白RNase抑制剂仅防止RNaseA,B,C对RNA的降解,并不能防止皮肤上的RNase,因此尽管使用了这些抑制剂,也要小心不要从手指上引入RNase,实验过程中经常更换新手套。
2、引物的选择
OligodT
选择OligodT时,要求RNA必须有PolyA,所以真核生物的mRNA都适用。适合长链甚至全长mRNA的RT,所以对RNA样品的质量要求较高,最好不要有明显的DNA污染、RNA降解和RNA断裂。假如想探索新的mRNA进行RT反应,建议推荐使用OligodT引物。使用OligodT引物要比随机引物和特异性引物的稳定性要好。
随机引物
适合各种RNA的RT,尤其适合模板丰度很低的情况(比如某个gene表达量很低)。选择随机引物时,第一链cDNA合成反应中就是以所有的RNA为模板,然后进行PCR反应时设计引物进行特异性扩增。同时要注意随机引物的量和总RNA量之间的关系,一般建议每5μg总RNA的随机引物的用量为50ng,如果每5μg总RNA的随机引物的用量超过250ng,可能会导致小片段产物(<500bp)的增加和长片断、全长产物产物的降低。
特异性引物
特异性引物只能用你设计引物时的下游引物做RT,引物设计质量影响RT的结果,而且不同引物退火温度本来就不相同,所以按照说明书按照一个温度做不是最佳选择,一般不推荐。向左转|向右转
暂无品牌问答