酶 联 免 疫 吸 附 实 验一直 接 细 胞 ELISA 法检测细胞表面抗原
酶联免疫吸附（
ELISA
）实验具体步骤及详细说明
酶联免疫吸附（
ELISA
）可以：
（
1
）免疫酶染色各种细胞内成份的定
位。
（
2
）研究抗酶抗体的合成。
（
3
）显现微量的免疫沉淀反应。
（
4
）定量检测
体液中抗原或抗体成份。
本法首先也是用特异性抗体包被于固相载体，经洗涤后加入含有抗原之待测样
品，如待检样品中有相应抗原存在，即可与包被于固相载体上的特异性抗体结
合，经保温孵育洗涤后，即可加入酶标记特异性抗体，再经孵育洗涤后，加底
物显色进行测定，底物降解的量即为欲测抗原的量。
这种方法欲测的抗原必须有两个可以与抗体结合的部位，因为其一端要包被于
固相载体上的抗体作用，而另一端则要与酶标记特异性抗体作用。因此，不能
用于分子量小于
5000
的半抗原之类的抗原测定。我们用在霍乱肠毒素的测
定。
HbSAg
及
HbS
的测定。
具体步骤
一、包被抗体：用包被缓冲液稀释特异性抗体球蛋白至最适浓度（
1
～
10ug
/ml
），每凹孔加
0.3ml
，
4
℃过夜，或
37
℃水浴
3
小时，贮存冰箱。
二、洗涤：移去包被液，凹孔用洗涤缓冲液（含
0.05%
吐温
-20
）洗
3
次，每
次
5
分钟。
三、每凹孔加入
0.2ml
用稀释缓冲液稀释的含抗原的被检标本，
37
℃作用
1
～
2
小时。
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发布于 ： 2021-08-05
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