【求助】酸性染料比色法测定总生物碱含量中遇到的问题
2007-03-31
问题描述:
我在做中药提取物中总生物碱含量测定,用的是酸性染料比色法,两次试验在处理样品时,同样的重量,同样的溶剂量,只是最后在调节PH值时一次用的是氨水调到9-10,一次用的氢氧化钠溶液调到9-10,但是发现用氨水调的溶液测定值明显比氢氧化钠调的要高得多,这是怎么回事呢?有同学说氨水可能有部分也与酸性染料形成络合物了,但是我的供试液是经三氯甲烷萃取,挥掉三氯甲烷,再用无水乙醇定容的,应该不会存在这种可能的.请教各位大侠,这是什么原因呢?
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PH_H100
用户
响应号召来讨论0回复贴:)1、原因是氨水不仅调节了 pH值,还参与反应生物碱+酸性染料的络合反应了,使得最后产生紫外-可见(你没说波长)吸收的物质的结构不一样。2、酸性染料或生物碱和氨水反应,生成了另外一种物质,这种物质能溶解在三氯甲烷重,被萃取了出来,而且在你的波长处有吸收。紫外可见没有分离功能,所以一并被测了出来。不过,本人不才,有个疑问,你难道没做空白么?另外,你没说你的试验方法,连波长都没有,怎么会有人回复呢?我是响应号召来的。
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防风半夏
用户
谢谢楼上的,的确没有说清楚,以后会注意的。
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