放射自显影原位杂交玻片的复染和压片固定实验一苏木精/伊红染色
实验方法原理 | |||||||||||
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实验材料 | 水化并显影的原位杂交玻片 试剂、试剂盒 | 苏木精染料(用乙酸处理的Harris改进苏木精无汞)0.1%氢氧化铵伊红染料 仪器、耗材 | 玻璃染色盘 实验步骤 | 1)将显影过的载玻片(在玻片架中)放入盛有水的染色盘中。 2)在染色盘中准备以下各组液体: 1个盘:苏木精染液 2个盘:水 1个盘:0.1%氢氧化铵 2个盘:水 1个盘:伊红染液 1个盘:95%乙醇 2个盘:100%乙醇 3个盘:二甲苯 3)在苏木精染液中染玻片20〜30s,勿染过深。水中浸泡2次,每次2min。 4)快速浸于0.1%氢氧化铵,然后浸入水中。 如果在0.1%氢氧化铵中浸泡时间过长,放射自显影乳胶会从玻片上脱离。 5)以水浸洗5min,然后用伊红染色20〜30s。 如染色过深,可将玻片浸于50%乙醇中,脱色片刻(观察染料扩散状况);如染色过弱,可再染。 6)在同一盛95%乙醇的盘中,浸洗玻片8次,然后,于100%乙醇中浸8次,再置100%乙醇中2min使完全脱水。在二甲苯中平衡3次,每次2min。 7)按基本方案步骤5〜9操作,进行固片处理。 注意事项 | 其他 | |
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发布于 : 2018-08-06
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