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结缔组织染色实验一网状纤维与胶原纤维染色
来自 : 蚂蚁淘
实验方法原理

网状纤维是网状结缔组织中的一种纤维,由交错排列的纤细的纤维组成。由于网状纤维由含有糖蛋白的胶原蛋白组成,这种组织蛋白质易与氨性银结合,再选用酸性染料染色液,能够显示网状纤维与胶原纤维的二种组织结构成分。常用Gomori银与丽春红-苦味酸复合染色法。

实验材料
试剂、试剂盒
实验步骤

氨性银溶液

甲液:硝酸银10.2g,蒸馏水100ml。

乙液:氢氧化钠3.1g,蒸馏水100ml。

取甲液5ml,滴加氨水至溶解清亮为止。再加入5ml乙液,此时溶液突然变为黑色,再滴加氨水至清亮为止。补加4滴氨水,用蒸馏水补足50ml。


高锰酸钾氧化液:高锰酸钾0.5g,蒸馏水95ml,3%硫酸5ml。


草酸漂白液:草酸2g,蒸馏水98ml。

硫酸铁铵液:硫酸铁铵2g,蒸馏水98ml。


1.石蜡组织切片,常规脱蜡至水。


2.高锰酸钾氧化液处理5min,自来水洗1min。


3.草酸漂白液浸泡2min,自来水1min。


4.硫酸铁铵液处理2min,自来水洗2次。


5.蒸馏水洗2次,氨性银溶液处理1min。


6.蒸馏水洗2次,20%甲醛液还原3min。


7.蒸馏水洗2次,0.2%氯化金处理1min。


8.蒸馏水洗2次,丽春红-苦味酸染色液处理3min。


9.无水乙醇脱水,二甲苯透明,中性树胶封固。

注意事项

1.配制氨性银溶液必须使用干净器皿,放在冰箱内保存,可用较长时间。


2.高锰酸钾氧化液存放时间不能过长,以免失去氧化效果。


3.氨性银染色后,不能将银液倾去,要将蒸馏水直接倒在组织切片上轻洗。

其他

结果:网状纤维呈黑色,胶原纤维呈红色,背景呈黄色。

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