实验方法原理 | 网状纤维是网状结缔组织中的一种纤维,由交错排列的纤细的纤维组成。由于网状纤维由含有糖蛋白的胶原蛋白组成,这种组织蛋白质易与氨性银结合,再选用酸性染料染色液,能够显示网状纤维与胶原纤维的二种组织结构成分。常用Gomori银与丽春红-苦味酸复合染色法。 | ||||||||
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实验材料 | 石蜡组织切片 试剂、试剂盒 | 二甲苯乙醇蒸馏水草酸硫酸铁铵高锰酸钾硫酸硝酸银氢氧化钠丽春红S水溶液苦味酸饱和液中性树胶 实验步骤 | 氨性银溶液 甲液:硝酸银10.2g,蒸馏水100ml。 乙液:氢氧化钠3.1g,蒸馏水100ml。 取甲液5ml,滴加氨水至溶解清亮为止。再加入5ml乙液,此时溶液突然变为黑色,再滴加氨水至清亮为止。补加4滴氨水,用蒸馏水补足50ml。 高锰酸钾氧化液:高锰酸钾0.5g,蒸馏水95ml,3%硫酸5ml。 草酸漂白液:草酸2g,蒸馏水98ml。 硫酸铁铵液:硫酸铁铵2g,蒸馏水98ml。 1.石蜡组织切片,常规脱蜡至水。 2.高锰酸钾氧化液处理5min,自来水洗1min。 3.草酸漂白液浸泡2min,自来水1min。 4.硫酸铁铵液处理2min,自来水洗2次。 5.蒸馏水洗2次,氨性银溶液处理1min。 6.蒸馏水洗2次,20%甲醛液还原3min。 7.蒸馏水洗2次,0.2%氯化金处理1min。 8.蒸馏水洗2次,丽春红-苦味酸染色液处理3min。 9.无水乙醇脱水,二甲苯透明,中性树胶封固。 注意事项 | 1.配制氨性银溶液必须使用干净器皿,放在冰箱内保存,可用较长时间。 2.高锰酸钾氧化液存放时间不能过长,以免失去氧化效果。 3.氨性银染色后,不能将银液倾去,要将蒸馏水直接倒在组织切片上轻洗。 其他 | 结果:网状纤维呈黑色,胶原纤维呈红色,背景呈黄色。 |