实验
4
细胞骨架的显示及观察
姓名:李思露
学号:
131140040
一、
实验目的
1.
掌握用考马斯亮蓝
R250
染色观察动物和植物细胞骨架的原理和方法。
2.
了解免疫荧光法检测细胞成分的原理和方法。
二、
实验原理
1.
细胞骨架:指真核细胞中的蛋白纤维网架体系。广义的细胞骨架包括细胞核骨架、
细胞质骨架、细胞膜骨架和细胞外基质。
狭义的细胞骨架是指细胞质骨架,
包括微
管(
microtubule
,
MT
)
、微丝(
microfilament
,
MF
)
、中间纤维(
intermediated
filament
,
IF
)
。
2.
微管微管是细胞内由微管蛋白形成的直径约
20~26nm
的长度不一的小管。分布在核周围,
呈放射状向胞质四周扩散,主要确定膜性细
胞器的位置和作为膜泡运输的导管。微管蛋
白有α和β
两种。
α
β异二聚体沿纵向聚
合成丝,原丝成环状排列形成微管的壁。微管
不稳定,对低温(冷冻)
、高压等物理因素及
秋水仙素(微管断裂剂)等化学因素敏感。紫
杉醇可以和微管蛋白多聚体结合,抑制微管解
聚。
3.
微丝:真核细胞内是主要由肌动蛋白(
actin
)组
成的直径为
5
~
7nm
的骨架纤丝。主要分布在细胞
质膜的内侧,作用是确定细胞表面特征、并与细胞
运动、收缩、内吞等功能有关。脊椎动物肌动蛋白
分为α、β和γ三种类型,不同种类细胞中肌动蛋
白组成不同。肌动蛋白单体为球形,依次连接成链,
两串肌动蛋白链互相缠绕扭曲成一股微丝。细胞松
弛素
B
为微丝断裂剂。
4.
中间纤维:直径介于微丝和微管之间(
7~11nm
)
、由多种不同蛋白组成的细胞骨架