实验方法原理 | 尼氏染色法(NisslStaining)是用碱性染料染神经组织的一种方法。尼氏体是胞质内的一种嗜碱性物质,广泛见于各种神经元,不同神经元中的尼氏体形状、大小和数量则各有差异。用于尼氏染色的碱性染料主要有焦油紫、亚甲蓝、甲苯胺蓝和硫堇等。我室主要用焦油紫和硫堇染色。尼氏染色法可以染出尼氏体,用来观察神经元内的细胞结构;还可以通过尼氏染色后对尼氏体的观察来了解神经元的损伤情况 | ||||||||
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实验材料 | 神经元 试剂、试剂盒 | 焦油紫硫堇 实验步骤 | (1)石蜡或冰冻切片依次经二甲苯、无水乙醇、95%酒精、80%酒精、70%酒精和蒸馏水,各自时间可以参考HE染色。 (2)1%焦油紫或1%硫堇染色10min至1h。 (3)蒸馏水清洗。 (4)70%酒精分色数秒至数分钟。 (5)依次经70%酒精、80%酒精、95%酒精,各2min脱水。 (6)无水乙醇2次,每次5min。二甲苯2次,每次10min。 (7)DPX封片。尼氏体呈紫色、细胞核呈淡紫色 注意事项 | (1)切片若为石蜡切片,要在二甲苯中先脱蜡。 (2)焦油紫或硫堇的染色时间也是根据染液配制时间的新旧、切片厚度和环境温度灵活掌握。 试剂准备: (1)焦油紫溶液1g焦油紫溶于100ml蒸馏水,溶解后过滤待用。 (2)硫堇溶液1g硫堇溶于100ml蒸馏水,溶解后过滤待用。 其他 | 展开 |