Properties:
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Description:
General description
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Other Notes
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Packaging
Unit quantity: Reference spectrum
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分子式:C14H22O(C2H4O)n
用途:Triton X-100是一种比较温和的去垢剂(表面活性剂或称界面活性剂),常作为添加剂使蛋白保持稳定,尤其是膜蛋白.
性质:
1.Triton X-100对细菌等微生物没有杀伤作用.
2.Triton X-100在紫外波段下有光吸收(lambda max = 275 nm and 283 nm in methanol),因此,当缓冲液中存在Triton X-100时不能通过测定280nm光吸收来进行蛋白定量.
3.Triton X-100常与CHAPS等zwitterionic 去垢剂一起使用来纯化膜蛋白,使膜蛋白保持其天然构象.
4.Triton X-100可以提高真核细胞细胞膜的通透性,因此在Immunostaining时常使用含 0.1%-0.5%Triton X-100的PBS或TBS.
5.Triton X-100非常稳定,密封避光 +2 to +8℃条件下可以长期保存.
6.Triton X-100是透明,略显粘稠,稍微发黄的液体.
7.Triton X-100的密度为1.07 g/ml,pH6.0-8.0(5%的溶液).
8.Triton X-100可以高压灭菌.
9.用Triton X-100来裂解细胞时,0.1% Triton X-100就足够了,不过,达到0.5%时也没问题.
10.蛋白酶K在含1% Triton X-100的溶液中依然保持活性.
11.可以使用Amberlite hydrophobic XAD resins and Rezorian A161 cartridges 来去除Triton X-100 .
去垢剂(又称表面活性剂)是一类即具有亲水基又具有疏水基的物质,一般具有乳化、分散、和增溶作用,可分阴离子、阳离子和中性去垢剂等多种类型,中性去垢剂在蛋白提取中应用的较多.
中性去垢剂又称非离子表面活性剂,对蛋白质的变性作用影响较少,宜于蛋白质或酶提取之用.一般市售中性去垢剂有聚乙二醇类,如PEG200;多元醇类表面活性剂,如山梨醇、司盘类和吐温类;聚氧乙烯脂肪醇醚,如苄泽类、平平加类;聚氧乙烯烷基苯酚醚,如Igepal CO、乳化剂OP、Triton、Pluronic(用作消泡剂、润湿剂、增溶剂)、泡敌.中性去垢剂作用后可通过Sephadex LH-50柱除去;也可直接上DEAE-Sephadex柱层析分离目的蛋白,不必先除去去垢剂.
如要膜蛋白保持原来的结构应采用:非离子型去垢剂.
B.阴离子去垢剂 常见的有十二烷基硫酸钠和十二烷基璜酸钠。前者可促进核蛋白的溶解,将核酸释放出来,并对核酸酶有一定抑制作用,常用于核酸的提取。
C.阳离子去垢剂 如洁尔灭、新洁尔灭、CTAB、CPC、ZEPH、克菌定、消毒净(TMPB)、杜灭芬等,消毒灭菌类居多。
D.天然表面活性剂 又称为生物表面活性剂,包括种类较为广泛,如各种树胶(阿拉伯胶、杏胶、桃胶、果胶)、明胶、皂甙、卵磷脂、豆磷脂、琼脂、海藻酸钠、酪蛋白、胆甾醇、胆酸类、多糖类(如环糊精)等。
E.两性表面活性剂 在碱性水溶液中呈阴离子表面活性剂的性质,起泡性好,去污力也强;在酸性溶液中则呈现阳离子表面活性剂特征,其杀菌性很强。向左转|向右转
如常用于缓冲的Tris、HEPES、MPOS等等,去垢剂如NP40,Tween-20,TritonX100,CHAPS,脱氧胆酸钠,SDS等等,
大家能说说这些试剂的使用区别吗(最好讲讲某些情况下使用一些会优于另一些的例子)
有时候某些裂解液含10%左右甘油,又是为何?
平时我们用习惯了一些配方,可能有时候不太清楚为何有些是可替代的,有些是不可替代的,借此机会想听听大家的见解?
我打算用HPLC分离已经初步纯化的蛋白,大小40kd到200kd,机器是安捷伦1200.
目前只有C18的柱子,用来分环肽。
如果分比较大的蛋白,有什么效果相对好的柱子,请推荐一下。
在网上见到有人说C18也可以试着分析大蛋白,不知道会不会堵,洗不下来?
我要做的两个目的蛋白,分子量一个是140的,另一个是36,内参用的GAPDH。这几天刚刚要做小鼠组织的蛋白,就把新提取的组织蛋白和之前做过的细胞蛋白一起上了,细胞和组织的各上了3个孔。
电泳转膜孵育等条件都是以前做成熟的
之后显影,细胞蛋白的,两个目的和内参都出得挺好;但是小鼠的组织蛋白只有分子量140的那个显出条带了,36的那个显出来的像一片水渍一样,斑片状的黑,内参有时也这样、有时干脆什么都不显。不知道这是什么原因...按说细胞同样的蛋白做出来,WB的各个步骤应该不会有太大问题的。
有点怀疑蛋白提取的不好,我提组织蛋白的的操作是在冰上进行的,裂解液也加有PMSF,用BCA法测得的蛋白浓度大概也有3~5mg/ml。
在这里求助各位高手~望给我指点一下~不胜感激啊!