细胞增殖生长方面实验一细胞计数法
| 实验方法原理 | 测定细胞绝对增长数值常用最简便的方法。 一般过程为 1. 接种21孔/24孔板细胞（如用培养瓶时则21瓶）。 2. 分7组，每组3孔（或瓶），培养一周（7天），期间逐日检测一组，计数。 3. 把7天中的细胞数值绘成图，即为细胞生长曲线。 | ||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 实验材料 | 细胞 试剂、试剂盒 | 胰蛋白酶 仪器、耗材 | 吸管 实验步骤 | 1. 悬液制备 取待测生长状态良好细胞，增长至接近汇合时，向培养瓶内加1ml升0.25%胰蛋白酶液，37℃温箱中消化，至细胞接近脱离瓶壁前吸出消化液、加新的培养液、轻吹打制备成细悬液、计数； 2. 接种 向每孔中接种等量细胞，置温箱中培养；把培养瓶中营养液倒入试管中并记录下毫升量； 3. 计数检测 从次日起，即开始检测第一组每个孔（或瓶）中的细胞总数，用计算盘或用细胞自动计数器计数，取3个孔的均值，如此至第7组结束； 4. 绘图 用座标图纸绘成生长曲线。 注意事项 | 1. 计数法简便易行，但不够精确，约有20%～30%的误差。为提高准确性，每孔也应计算2～3次，则总和每组计算总次数达6次～12次，均值可能更为精确。 2. 细胞数量增加1倍的时间称倍增时间，亦可从细胞生长曲线中测知。 |
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发布于 ： 2018-08-03
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