pH标准色阶的制备实验
实验方法原理 | 酚红是常用的一种指示剂。在pH7.4时,它呈红色;pH7.0时,变成橘红色;pH6.5呈黄色;低于pH6.5时,呈柠檬黄;pH7.6呈桃红色;pH7.8呈紫红色。由于颜色的判断有较高的主观性,制作一个标准色阶是很有用的:可以用灭菌的平衡盐溶液(BSS)及酚红按常规浓度配制,装在相同的瓶子里,上端剩余的空间也相同,一般在配制培养基时可以使用它。以下方案是以使用25。耐的培养瓶为例。 |
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实验步骤 | 材料 无菌的 Hank"s平衡盐溶液(HBSS),或Eagle"sMEM10倍浓缩液,不含碳酸盐或葡萄精.含有20mmol/LHEPES10ml 超纯水(UPw)90ml 1mol/LNaOH10ml 常用容器,30ml 培养瓶.25cm2 加样器吸头,100闪 非无菌物品 pH计 加样器吸头,10~100ul 操作步骤 1.配制H冷汽或培养基,pH6.5或稍低于6.5,分装至7个标记好的常用容器中. 2.使之在空气中平衡30min. 3.用lmol/LNaOHH将各容器中的液体分别调节至pH6.5、6.8、7.0、7.2、7.4、7.6、7.5,以pH计侧试. 4.取每种HBSS过滤除菌,收集5m!分装至标记好的培养瓶内,收集之前先用5ml冲洗滤器. 5.将培养瓶盖好. |
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发布于 : 2018-08-06
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