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pH标准色阶的制备实验

来自 : 蚂蚁淘
实验方法原理酚红是常用的一种指示剂。在pH7.4时,它呈红色;pH7.0时,变成橘红色;pH6.5呈黄色;低于pH6.5时,呈柠檬黄;pH7.6呈桃红色;pH7.8呈紫红色。由于颜色的判断有较高的主观性,制作一个标准色阶是很有用的:可以用灭菌的平衡盐溶液(BSS)及酚红按常规浓度配制,装在相同的瓶子里,上端剩余的空间也相同,一般在配制培养基时可以使用它。以下方案是以使用25。耐的培养瓶为例。
实验步骤
材料

无菌的

Hank"s平衡盐溶液(HBSS),或Eagle"sMEM10倍浓缩液,不含碳酸盐或葡萄精.含有20mmol/LHEPES10ml

超纯水(UPw)90ml

1mol/LNaOH10ml

常用容器,30ml

培养瓶.25cm2

加样器吸头,100闪

非无菌物品

pH计

加样器吸头,10~100ul

操作步骤

1.配制H冷汽或培养基,pH6.5或稍低于6.5,分装至7个标记好的常用容器中.

2.使之在空气中平衡30min.

3.用lmol/LNaOHH将各容器中的液体分别调节至pH6.5、6.8、7.0、7.2、7.4、7.6、7.5,以pH计侧试.

4.取每种HBSS过滤除菌,收集5m!分装至标记好的培养瓶内,收集之前先用5ml冲洗滤器.

5.将培养瓶盖好.
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发布于 : 2018-08-06 阅读(8)
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