Description
GenJetDNAInVitroTranfectionReagentisapowerfultransfectionreagentthatensureseffectiveandreproducIBLetransfectionwithinvisibletoxicity.GenJetisformulatedbyuniquechemistry(covalentlycross-linkingcationiclipidswithpolymer),givingrisetoexceptionaltransfectionefficiencywithdistinguishablefeaturesincomparisonofothertypesofreagents.GenJetwasshowntodelivergenestovariousestablishedcelllinesaswellasprimarycellsincludingHEK293,293T,293E,CHO,COS1,HeLa,NIH3T3,insectcelllines(Sf9andSf21)andavarietyofothereucaryoticcelllines.GenJetreagent,1.0ml,issufficientfor~666transfectionsin24wellplatesor~333transfectionsin6wellplates.
Application
-DeliverDNA/RNAintomammalian,insectcells
-Greatlyenhance(upto200timeshigherefficiency)virus(e.g.,replication-deficientAdenovirus)infectionofhard-to-transfectcells
Features
-Exceptionalhightitersofvirusproduction
-EquallygoodforverylongDNAs(upto56kb)
-EquallygoodforsingleormultipleDNAtransfections
-Exceptionalhighlevelsofrecombinantproteinproduction
-Topchoiceforhard-to-transfectcells
-Inexpensivetransfectionreagent
StorageCondition
Storeat4°C.Ifstoredproperly,theproductisstablefor12monthsorlonger.
BroadTransfectionSpectrumforMammalianCellTypes
CellLines | TransfectionEfficiency(%GFP) | CellLines | TransfectionEfficiency(%GFP) |
3LL | 51% | K562 | 22%
ExceptionaltransfectionefficiencyofextremelylongDNAbyGenJetDNAInVitroTransfectionReagent.HEK293cellsweretransfectedwithGFPtaggedDNA(total14kb)byGenJet(upperpanel)andFuGene6(lowerpanel)respectively.ThecellswerevisualizedbyNikonEclipseFluorescencemicroscopewithDICphase(leftpanel)andFITC(rightpanel)imaging24hoursposttransfection Exceptionalhightitersoflentivirusgeneratedfrom293Fcells.ThreeDNAsco-transfectedwithGenJetInVitroDNATransfectionReagent(leftpanel)incomparisonofLipoFectamine2000(L2K,rightpanel).100microlitervirussupernatantfrom293Fcellswereusedtocounter-infected293FcellswhichwasthenpassedFACS.Thenumbersattheupperrightcornerindicatethepercentageoftransducedcells.ThetitersoflentivirusgeneratedwithGenJetandL2Kwerequantifiedtobe7.9x106and3.1x106tu/mlrespectively PrimaryMurineSkinFibroblasttransfectedwithpEGFP-C1plasmidusingGenJetInVitroDNATransfectionReagent(upperpanel)andthemostpopularbrandproductFuGeneHD(lowerpanel).ThecellswerevisualizedbyNikonEclipseFluorescencemicroscopewithDICphaseimaging(leftpanel)andFITCimaging(rightpanel)24hourspost-transfection PrimaryMurineKeratinocytestransfectedwithpEGFP-C1plasmidusingGenJetInVitroDNATransfectionReagent(upperpanel)andoneofthemostpopularbrandproductFuGeneHD(lowerpanel).ThecellswerevisualizedbyNikonEclipseFluorescencemicroscopewithDICphaseimaging(leftpanel)andFITCimaging(rightpanel)24hourspost-transfection ComparisonofcytotoxicityofGenJetDNAInVitroTransfectionReagentwithL2Konprimarymurineskinfibroblast.Theprimarymurinefibroblastwasincubatedwiththeindicatedtransfectionreagents/pEGFP-C1(DNA)complexesabovefor4hoursinserum-freeDMEMHighGlucosemediumfollowedbyreplacementofcompleteserum-containingmedium.ThecellswerevisualizedbyNikonEclipseFluorescencemicroscopewithDICphaseimaging24hoursposttransfection
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蚂蚁淘(www.ebiomall.cn)是中国大陆目前唯一的生物医疗科研用品B2B跨境交易平台,
该平台由多位经验丰富的生物人和IT人负责运营。蚂蚁淘B2B模式是指客户有采购意向后在蚂蚁
淘搜索全球供应信息,找到合适的产品后在蚂蚁淘下单,然后蚂蚁淘的海外买手进行跨境采购、
运输到中国口岸,最后由蚂蚁淘国内团队报关运输给客户...
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2019-01-28
河南佰柯生物科技有限公司在发布的293T Transfection Reagent for Lentivirus Packaging(293T细胞转染试剂(慢病毒包装))供应信息,浏览与293T Transfection Reagent for Lentivirus Packaging(293T细胞转染试剂(慢病毒包装))相关的产品或在搜索更多与293T Transfection Reagent for Lentivirus Packaging(293T细胞转染试剂(慢病毒包装))相关的内容。 查看更多
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2021-08-04
北京英格恩生物科技有限公司在发布的RNA专用转染试剂-R4000供应信息,浏览与RNA专用转染试剂-R4000相关的产品或在搜索更多与RNA专用转染试剂-R4000相关的内容。 查看更多
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2018-12-26
-Use sterile technique and sterile solutions in steps 1 to 3.- 1. Using a saturated starter culture, inoculate 25 to 30 ml of appropriate media in a 125 ml fla 查看更多
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2019-01-17
北京华泰昕生物医疗技术有限公司在发布的PerFectin™转染试剂供应信息,浏览与PerFectin™转染试剂相关的产品或在搜索更多与PerFectin™转染试剂相关的内容。 查看更多
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PurposeThe main purpose of the flow chamber assay is to visualize and measure interactions between flowing cells expressing a given adhesion molecule on their 查看更多
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2021-08-12
上海钰博生物科技有限公司在发布的Trans-fect常见细胞系转染试剂供应信息,浏览与Trans-fect常见细胞系转染试剂相关的产品或在搜索更多与Trans-fect常见细胞系转染试剂相关的内容。 查看更多
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2021-07-19
河南佰柯生物科技有限公司在发布的Transfection Reagent(DNA/RNA)(转染试剂)供应信息,浏览与Transfection Reagent(DNA/RNA)(转染试剂)相关的产品或在搜索更多与Transfection Reagent(DNA/RNA)(转染试剂)相关的内容。 查看更多
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2019-08-13
Lipofectamine3000 转染试剂购自美国 Invitrogen 公司;DNA-InCRISPR 转染试剂购自英国 Amsbio 公司;质粒提取试剂盒购自美国 Omega 公司;Cell Counting... 查看更多
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2018-12-26
小提.pdfplasmid.pdfVigoFect.pdfmatrigel.pdf 查看更多
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2020-03-17
妙通(上海)生物科技有限公司在发布的人脐静脉内皮细胞转染试剂盒,Cytofect™ HUVEC Transfection Kit供应信息,浏览与人脐静脉内皮细胞转染试剂盒,Cytofect™ HUVEC Transfection Kit相关的产品或在搜索更多与人脐静脉内皮细胞转染试剂盒,Cytofect™ HUVEC Transfection Kit相关的内容。 查看更多
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2019-04-07
脂质体介导的真核细胞转染实验的相关实验步骤、实验技巧、实验protocol、实验经验及常见问题。用脂质体将DNA导人各种真核细胞的效率比其他转染方法更高,重复性更好。 查看更多
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2018-12-26
一、Mallory三色染色法1. 试剂配制(1)重铬酸钾液 重铬酸钾2.5g,醋酸5ml,蒸馏水95ml(2)苯胺蓝桔黄G液 苯胺蓝0.5g,桔黄G2g,磷钨酸1g,蒸馏水100ml(3)酸性复红液 酸性复红0.5g,蒸馏水100ml2.染色步骤(1)中性甲醛液固定组织,石蜡切片,常规脱蜡至水。(2)重铬酸钾液10m 查看更多
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如何提高悬浮细胞转染效率?123
你莫愁3672017-10-02
悬浮细胞的转染方法:(以下内容转自生物帮资讯)
DXY721认为: 悬浮细胞和贴壁细胞在转染过程中差别不大,主要差别在于转染后的筛选,当然如果你做的是瞬时转染就不存在筛选的问题了。 其实转染的过程很简单,问题是能不能转的进去的,转染率能有多少,转进去是否可以稳定表达目的蛋白等等。 我们也是用脂质体做悬浮细胞的转染,说明书上都有具体的操作过程,将脂质体和目的基因按比例混合,然后加到细胞悬液里就OK了,说的简单,实际上还是有一些细节要注意的,比如脂质体和目的基因混合的比例,转染的细胞数,细胞的代数,细胞的状态,有的还要求在转染的前一天传代一次,不过不要怕,这些在脂质体说明书上都有明确的说明,按照说明书做就可以了。 jinghuanlv认为: 悬浮细胞和贴壁细胞转染还是有很大不同的。 脂质体转染的原理基于电荷吸引原理,先形成脂质体-DNA复合物,散布在细胞周围,然后通过细胞的内吞作用,将目的基因导入细胞内,而脂质体复合物与贴壁细胞的接触机会比悬浮细胞高出很多倍,所以,脂质体转染时悬浮细胞的转染效率要明显低于贴壁细胞。 我们实验室转染悬浮细胞是用的电穿孔法,目前为止,悬浮细胞转染的最好方法还是电转,我们实验室用的电转仪是Bio-Rad的,使用条件是电压250V,电容975uF,效果不错,不妨一用。
细胞转染,为什么有许多孔的细胞死了?_123
qingwudarao2021-07-27
【求助】DC细胞转染 细胞技术讨论版123
蓝天98962021-08-15
高效率转染RAW 264.7细胞方法 123
生气的小菊花2016-07-19
本人研究生
细胞转染几天后就死亡,是什么原因? 细胞技术讨论版论坛123
duocaihui2021-07-24
我转的是7901、7901/DDP两种细胞,前者7901细胞很容易就转上,并且转后,状态良好,可是7901/DDP一转就死,我用的是吉玛慢病毒,转24小时后换液,刚开始一两天,没有异常,但后来细胞慢慢就死了,并且不是漂浮的,很多是贴着壁死,像是瓦解了一样 这是未转时细胞的样子 这是细胞转后,死亡的样子 并且即使是有些细胞未死,细胞后来也变得很脏,感觉有很破碎的细胞碎片 本人实验小白,**园子里大神指点,急,实在不知道怎么回事
GFP怎么转染细胞 本人新手,载体从哪来123
我爱金桥妹妹kq2017-10-02
细胞转染GFP质粒并进行表达之后,一般细胞内会有大量的GFP蛋白,可以发出绿色荧光。
GFP发出绿色荧光的原理是Ca离子进入GFP的beta-barrel结构中引起的特定能级,因此只要这个结构仍然保持着,就可以发出荧光。 由于GFP的beta-barrel结构非常稳定,一些版本的GFP蛋白(如EGFP)甚至能抵抗94C的高温几分钟而不完全变性,因此想在溶液状态下去掉GFP的荧光是很难的,一般需要用光漂白法。 基于其非常稳定的结构,即便细胞被固定了,仍然会有一部分的GFP蛋白保持其构象而发出荧光。此时荧光可能较弱。在荧光显微镜下是有可能看得到的。
siRNA转染后什么时候做蛋白检测(如WesternBlot)最好?_sales 123
狗狗乓北252021-08-08
细胞转染时遭遇细胞污染怎么办123
一鸣NFha702017-10-01
腺相关病毒(AAV)是一种人细小病毒,目前因为能作为一种基因治疗载体而受到广泛关注。构建重组AAV(rAAV)涉及到用一个目的基因替换病毒基因组的大部分,然后将这个重组基因组包装到一个有感染性的病毒颗粒里。目前大多数生成rAAV的实验方案需要共转染一个载体质粒和一个表达病毒复制和结构基因的包装质粒到腺病毒(Ad)感染的培养细胞中。此方法的局限性包括(1) Ad辅助病毒污染rAAV,(2)rAAV的低产出,(3)生成有复制能力的AAV。在此我们描述了新的辅助质粒(pH3和pH5),排除了Ad共转染的需求。辅助质粒表达AAV的rep和cap基因和Ad E2A、VAI和E4基因。当辅助质粒在没有Ad感染的情况下共转染到人293细胞中,rAAV载体产量超过了pAAV/Ad包装质粒的80倍。另外,有复制能力的AAV在rAAV制备过程中少于0.00125%。此系统的主要优点是(1)无需感染性的腺病毒(2)只使用两个质粒就提高了转染效率和载体的产出。我们相信该双质粒转染系统因其简便性和高产出而使AAV载体系统能被更广泛地使用。该系统尤其将对多rAAV载体的临床前分析有用。
细胞转染 123
忻忻相惜4582021-08-01
对于脂质体转染与电穿孔转染都无法成功转染的细胞系建议用病毒感染,此法可以快速100%感染,检测成功率高。向左转|向右转
我猜你不知道,细胞转染率低是因为这个上海中洪博元123
autumn--19892021-08-02
影响转染试验的因素: 1转染试剂跟细胞系不匹配 转染试剂跟细胞系也是讲究配合默契的,使用同一种试剂,不同细胞系转染效率通常不同。但细胞系的选择通常是根据实验的需要,因此在转染实验前应根据实验要求和细胞特性选择适合的转染试剂。每种转染试剂都会提供一些已经成功转染的细胞株列表和文献,通过这些资料可选择最适合实验设计的转染试剂。当然,最适合的是高效、低毒、方便、廉价的转染试剂。 2细胞状态变化 因为有些细胞系是不稳定的,可能随着培养时间的改变,培养条件的不同,不同的选择压力,可能引起不同的克隆选择。因此就算是同一个细胞系,在不同条件下转染能力的差异可能会 很大 (1)转染试剂与细胞不匹配 细胞转染最适合的不是原代细胞,也不是传代很多次的细胞。这是因为细胞培养在实验室中保存数月和数年后会经历突变,总染色体重组或基因调控变化等而演化。这会导致和转染相关的细胞行为的变化。最适合转染的细胞是经过几次传代后达到对数生长期的细胞,细胞生长旺盛,最容易转染。 (2)把握时机 没错!转染也有适当的时机,相比较非分裂细胞——分裂细胞往往要比静止细胞更易于摄取并表达外源DNA。因此对大多数转染操作而言,细胞都在转染当天或前一天种板。 同样重要的是细胞在种板进行转染时不应处于过度生长的状态,如癌细胞数量过多,互相叠加,营养物质耗竭,代谢废物积聚,转染率低下也是很正常的! 因此,一定要在最适细胞密度时转染,才能获得较高的转染率。不同的转染试剂,要求转染时的最适细胞密度各不相同,即使同一种试剂,也会因不同的细胞类型或应用而异。 (3)微生物来捣乱 培养物可被细菌、酵母、真菌、病毒、支原体、甚至其他细胞种类所污染。各种污染都会导致产生错误的结果。 (4)交叉污染 如果同一个实验室同时培养不同种类的细胞,很同意发生“细胞串门”的现象,造成交叉污染。 3转染方法 不同转染试剂有不同的转染方法,但大多大同小异。转染时应跟据具体转染试剂推荐的方法,但也要注意,因不同实验室培养的细胞性质不同,质粒定量差异,操作手法上的差异等,其转染效果可能不同,应根据实验室的具体条件来确定最佳转染条件。 (1)血清 转染后未及时加入血清,会导致细胞大量死亡。一般要在转染后的4-6小时换液且换为有血清的培养基。也可以在原来的无血清培养基里面滴加血清。这个时候,最好不要换液,不要打扰细胞,让它安安静静地休息。但是也不能过早加入血清。过早的话,会引起未转染的细胞疯狂生长。那么,什么是最佳时机呢?在20%的细胞变圆的时候,就是加血清的最佳时机。 不过要特别注意:血清是一种包含生长因子及其它辅助因子的不确切成分的添加物,对不同细胞的生长作用有很大的差别。血清质量的变化直接影响细胞生长,因此也会影响转染效率。新加培养基的预热对细胞转染很有帮助。 (2)DNA质量 DNA质量对转染效率影响非常大。一般的转染技术(如脂质体等)基于电荷吸引原理,如果DNA不纯,如带少量的盐离子,蛋白,代谢物污染都会显著影响转染复合物的有效形成及转染的进行。 4载体构建 转染载体的构建(病毒载体,质粒DNA,RNA,PCR产物,寡核苷酸等)也影响转染结果。因此选择组成或可调控,强度合适的启动子也很重要,同时做空载体及其它基因的相同载体构建的转染正对照可排除毒性影响的干扰。 所以转染用的质粒首先要保证数量,一般为2μg以上。质粒纯度不够或者含有细菌LPS或其他对细胞有毒害作用的物质,也会影响转染效率。这个时候,就应该对质粒进行纯化和浓缩。 以上就是细胞转染率低的主要原因了,在实验过程中有没有遇到什么棘手的问题呢,欢迎留言讨论
请教siRNA细胞转染效率问题 细胞技术讨论版论坛123
齐宗献2021-08-10
【求助】293FT包装细胞可否用293T代替123
弑神ZS032021-07-25
现在这个行业发展的不错,生物实验技术外包也会跟着发展,比如一些高校或者企业部分实验不想自己内部开展,或者涉及的设备比较昂贵,技术要求高,都会寻求外包。但是现在竞争也比较大,的得看单位这边整体做的怎么样。
做的比较好的,一般都是上海地区的,你可以看下基尔顿生物。 ▍
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