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Jena Bioscience/8-(6-Aminohexyl)-amino-cAMP-ATTO-665/800 μl (0,1 mM)/NU-851-665
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Jena Bioscience/8-(6-Aminohexyl)-amino-cAMP-ATTO-665/800 μl (0,1 mM)/NU-851-665
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jenabioscience
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NU-851-665
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Structural formula of 8-(6-Aminohexyl)-amino-cAMP-ATTO-665

excitation and emission spectrum of ATTO 665

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Molecular Formula: C16H25N7O6P - ATTO 665 (free acid)

Molecular Weight: 1047.39 g/mol (free acid)

Purity: ≥ 95 % (HPLC)

Form: clear aqueous solution

Concentration: 0.10 mM - 0.11 mM

pH: 7.5 ±0.5

Spectroscopic Properties: λexc 662 nm, λem 680 nm, ε 160.0 L mmol-1 cm-1 (Tris-HCl pH 7.5)

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PCR常见问题 一.没有扩增产物 1.循环温度:变性温度、退火温度 2.引物设计 3.DNA聚合酶活性 4.抑制性成份(蛋白酶、核酸酶、其它抑制聚合 酶活性的成份) 5、DNA样品 二.非特异产物及电泳呈涂布状 1.Mg2 浓度 2.调整引物、模板、聚合酶的用量 3.适当减少循环数 4.适当提高退火温度,缩短退火或延 查看更多>
ADP-ribosylation factors (ARFs) are 20-kDa guanine nucleotide-binding proteins, members of the Ras GTPase superfamily that were initially recognized and purifi 查看更多>
DNA Fragmentation Assays for Apoptosis ProtocolProtocol I: Triton X-100 Lysis Buffer In 96 flat-wells plate, incubate 4x10 6 target cells (40 wells of 105 per 查看更多>
上海康朗生物科技有限公司在发布的尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶1(NOX1)重组蛋白供应信息,浏览与尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶1(NOX1)重组蛋白相关的产品或在搜索更多与尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶1(NOX1)重组蛋白相关的内容。 查看更多>
此法系可用于从低熔点琼脂糖凝胶中回收 DNA 的放射性标记 ( Feinberg 和 Vogelstein 1983,1984)。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。 查看更多>
Basic Method for Direct Immunofluorescence Labeling BackgroundThis is the method for direct immunofluorescence labeling; that is, the antibodies have the fluor 查看更多>
ParaformaldehydeFixationofCellsBackgroundThisfixationmethodisgoodforcellslabelledbyFluorochrome-conjugatedantibodiestomembraneantigens.ItwillstABIlizethelightscatterandlabellingforuptotoaweekinmostinstances,allowingyoutobemoreflexIBLeinschedulingcytometer 查看更多>
一、 材料准备:1.细胞爬片:细胞爬片经固定液-4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.0-7.6),含有1/1000 DEPC,固定15min。经无水乙醇、95%、85%和75%乙醇各2min脱水。2.探针: 多聚寡核苷酸探针-FITC     2ug/ml二、 FISH操作流程 暴露mRNA 核酸片段:细胞爬片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2 滴浓缩型胃蛋白酶,混匀),37℃消化5 分钟。 ... 查看更多>
上海钰博生物科技有限公司在发布的5-核苷酸酶测试盒(5-NT)供应信息,浏览与5-核苷酸酶测试盒(5-NT)相关的产品或在搜索更多与5-核苷酸酶测试盒(5-NT)相关的内容。 查看更多>
随机引物法(在融化琼脂糖存在下利用随机寡核苷酸延伸进行DNA的放射标记) 的相关实验步骤、实验技巧、实验protocol、实验经验及常见问题。此法系可用于从低熔点琼脂糖凝胶中回收 DNA 的放射性标记 ( Feinber... 查看更多>
磁珠聚核苷酸纯化试剂盒是由北京鸿跃科技有限公司代理或销售的OMEGA品牌的试剂,产品来源于美国。北京鸿跃科技有限公司是中国最权威的磁珠聚核苷酸纯化试剂盒试剂销售服务商之一,在北京等地方销售磁珠聚核苷酸纯化试剂盒试剂已经多年。生物在线为您提供众多企业磁珠聚核苷酸纯化试剂盒仪器产品及图片,以便挑选到性价比高,合适的磁珠聚核苷酸纯化试剂盒产品 查看更多>
1993年第一种microRNA(miRNA) lin-4在线虫(C. elegans)中被发现,至今已有二十年了。这一发现,揭开了人类深入认识生物体内源性非编码RNA(non-coding RNA,ncRNA)功能的序幕。近十年来,对以miRNA和long non-coding RNA(lncRNA)为代表的非编码RNA的研究突飞猛进。ncRNA已成为分子生物学和分子医学研究的重要热点领域之一,miRNA和lncRNA的研究成果不断涌现,它们已成为生命科学研究领域的“富 查看更多>
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成功转染siRNA的细胞会产生目标基因表达下调,但未成功转染的细胞却不受影响,这时转染效率和总的细胞数量就很重要,一般细胞数量较少时转染效率高,一些试剂由于本身毒性的影响,太低的细胞数量时毒性明显,所以会要求较高的细胞密度(汇合度),顺便说一句,看一个转染试剂的毒性,看它要求转染时的细胞密度就知道了。siRNA的转染和DNA的转染不一样,DNA的转染是过量表达,死亡一些细胞对过量表达的蛋白本身来说影响不大,但siRNA的转染,死亡的细胞所有的基因表达(包括特定目标基因)都下降,将与siRNA造成的特定目标基因的表达下降现象是一致的,将大大影响实验结果。选用低细胞毒性的转染试剂其实很重要,比如engreen的Entranster-R4000.

由于siRNA沉默时效性的影响,转染后48小时才能进行进行qRT-PCR检测,转染后48-72小时才能进行蛋白检测。如果转染时铺板密度较高,细胞一方面转染效果不理想,直接影响沉默效果和数据可靠性,另一方面,48小时甚至更长时间后,沉默检测最佳点时,过于密集的细胞将影响细胞状态,从而影响实验结果。


各位大神,想求解下关于siRNA和shRNA的区别。了解到shRNA是构建到载体转染细胞,也可以构建好了包慢病毒。但是不知道siRNA设计合成后,可不可以包到慢病毒上?如果可以的话,那么这两个都可以包到慢病毒上,效果有什么区别?

有问题要请教实验前辈!

用SiRNA抑制蛋白A的表达,SiRNA转染48小时后可观察到蛋白A表达明显下降.

现在想检测SiRNA抑制A蛋白表达后对凋亡蛋白、迁移蛋白及周期蛋白的影响,应该在SiRNA干扰后多长时间检测这些蛋白的变化?48小时?72小时?96小时?

望高手解答,我的理解是转染48小时后A蛋白表达下降,如果要观察A蛋白对以上蛋白的影响,应该在转染后超过48小时再检测这些蛋白的变化,比如72小时或96小时,不知道我的理解对不对?

先谢了!

probe英[prəʊb]美[proʊb]
n.[医] (对伤处等的) 针探,探查; [医] 探针,取样器; 探测仪;探头;
vt.探索,调查; 用探针(或探测器等)探查,探测;
vt.盘问; (用试探性袭击等)侦察(敌情) ; 用尖物刺穿(物件); 用力使向前推进;
The more they probed into his background, the more inflamed their suspicions would become
他们越调查他的背景,疑团就越多。
看有的文献上把tRNA和rRNA列入了ncRNA的范围,而有些则分开来讨论,到底哪种分类比较准确呢?

另外,最近测了些tRNA的二级结构,发现有部分不是三叶草结构,但是以前看文献上说tRNA都可以形成三叶草结构的,所以有些不解,望指点,非常感谢!
eve如何移动扫描探针 123
dem01234567892021-08-01
在恒星星图里完全没有什么圈啊,方向啊那些
没法移动,也没有办法看信号强度啊?
【共享】siRNA对照解析123
白堤8544539862021-08-18
不会,siRNA识别靶序列是有高度特异性的,因为降解首先在相对于siRNA来说的中央位置发生,所以这些中央的碱基位点就显得极为重要,一旦发生错配就会严重抑制RNAi的效应。
求助:
编码线虫的氨基酰tRNA合成酶是否和编码大鼠的氨基酰tRNA合成酶的基因相同?
你好,很高兴回答你的问题。
探针就是DNA弹针。用于检测特定的DNA片段。
基因探针,即核酸探针,是一段带有检测标记,且顺序已知的,与目的基因互补的核酸序列(DNA或RNA)。基因探针通过分子杂交与目的基因结合,产生杂交信号,能从浩翰的基因组中把目的基因显示出来。根据杂交原理,作为探针的核酸序列至少必须具备以下两个条件:①应是单链,若为双链,必须先行变性处理。②应带有容易被检测的标记。它可以包括整个基因,也可以仅仅是基因的一部分;可以是DNA本身,也可以是由之转录而来的RNA。
进行分子突变需要大量的探针拷贝,后者一般是通过分子克隆(molecular cloning)获得的。克隆是指用无性繁殖方法获得同一个体、细胞或分子的大量复制品。当制备基因组DNA探针进,应先制备基因组文库,即把基因组DNA打断,或用限制性酶作不完全水解,得到许多大小不等的随机片段,将这些片段体外重组到运载体(噬菌体、质粒等)中去,再将后者转染适当的宿主细胞如大肠肝菌,这时在固体培养基上可以得到许多携带有不同DNA片段的克隆噬菌斑,通过原位杂交,从中可筛出含有目的基因片段的克隆,然后通过细胞扩增,制备出大量的探针。
为了制备cDNA 探针,首先需分离纯化相应mRNA,这从含有大量mRNA的组织、细胞中比较容易做到,如从造血细胞中制备α或β珠蛋白mRNA。有了mRNA作模板后,在逆转录酶的作用下,就可以合成与之互补的DNA(即cDNA),cDNA与待测基因的编码区有完全相同的碱基顺序,但内含子已在加工过程中切除。
寡核苷酸探针是人工合成的,与已知基因DNA互补的,长度可从十几到几十个核苷酸的片段。如仅知蛋白质的氨基酸顺序量,也可以按氨基酸的密码推导出核苷酸序列,并用化学方法合成。

我想要定量血浆miRNA,目前用的方法就是Qiagen公司的血浆提取、逆转、SYBGreenPCR试剂盒引物也是qiagen,目前做出来的结果不是很理想,公司不提供引物序列,只有miRbase上的参考序列,想要证明引物序列、扩增产物是否是我们想要的,有人推荐设计Tapman探针,再做PCR,对比SYBGreenPCR结果,从而来看引物特异性。我的问题是:这样对比有意义吗?我问过很多公司做tapman只合成不设计,要自己提供序列,可我只有数据库中的参考序列,如果我自己有序列了不就可以合成特异引物,为啥要用tapman探针来验证呢?求专业人士答疑解惑!谢谢

Small interfering RNA (siRNA):是一种小RNA分子(~21-25核苷酸),由Dicer(RNAase Ⅲ家族中对双链RNA具有特异性的酶)加工而成.SiRNA是siRISC的主要成员,激发与之互补的目标mRNA的沉默.
与小分子siRNAs相比,尽管两者在分子特性、生物起源等方面是相似的,但也存在不少的差异.siRNAs是由dsDNA在Dicer酶切割下产生,而成熟miRNAs的产生要复杂一些,首先pri-miRNA在核内由一种称为Drosha酶处理后成为大约70nt的带有茎环结构的Precursor miRNAs (pre-miRNAs)(Denli et al.,2004; Gregory et al.,2004; Han et al.,2004);这些pre-miRNAs在Exportin-5帮助下转运到细胞核外之后再由胞质Dicer酶进行处理,酶切后成为成熟的miRNAs(Lund et al.,2004; Yi et al.,2003).两者的作用机制上也存在差别,成熟的miRNAs则是通过与miRNP核蛋白体复合物结合,识别靶mRNA,并与之发生部分互补,从而阻遏靶mRNA的翻译.在动物中,成熟的单链miRNAs与蛋白质复合物miRNP结合,引导这种复合物通过部分互补结合到mRNA的3′UTR(非编码区域),从而阻遏翻译.而在siRNA通路中,单链的siRNA结合到RISC复合物中,引导复合物与mRNA完全互补,通过其自身的解旋酶活性,解开siRNAs,通过反义siRNA链识别目的mRNA片段,通过内切酶活性切割目的片段,接着再通过细胞外切酶进一步降解目的片段.除此之外,miRNA也可以切割完全互补的mRNA,而siRNA也可以阻遏3′UTR具有短片断互补的mRNA的翻译.